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    如图（一）为某基因工程中利用的质粒筒图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素（抗生素）抗性基因，tctR为四环素（抗生素）抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点．已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点．如图（二）为几种酶作用于基因的位置．请回答下列问题：
    （1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的
     
    酶；二是将目的基因与运载体拼接的
     
    酶；三是作为运载体的质粒．
    （2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的动载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有“
     
    ”、“
     
    ”、“
     
    ”三种，其中有效的（所需要的）重组DNA是
     
    ，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯．
    （3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（重组DNA）与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（重组DNA）是
     
    ．
    （4）有效的重组DNA成功导入受体细胞进行表达时，首先需要进行转录，RNA聚合酶识别和结合的位点是图（一）中的
     
    ．在动物基因工程中，将重组DNA导入受体细胞的常用方法是
     
    ．
    （5）在基因工程中，作用于图（二）所示a位置的酶是
     
    ；作用于b位置的酶是
     
    ．
    考点：基因工程的原理及技术
    专题：
    分析：据图（一）分析，质粒中含有限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，便于插入目的基因；ampR为青霉素（抗生素）抗性基因和tctR为四环素（抗生素）抗性基因属于标记基因，便于重组质粒的鉴定和筛选；P为启动子是RNA聚合酶的识别和结合位点，启动转录过程；T为终止子，是终止转录的特点核苷酸序列．
    根据图（二）分析，a为磷酸二酯键，b表示氢键．
    解答： 解：（1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因限制酶；二是将目的基因与运载体拼接的DNA连接酶；三是作为运载体的质粒．
    （2）用同一种限制酶将有目的基因的DNA与运载体（质粒）切割，形成相同的黏性末端，经DNA连接酶进行拼接形成重组DNA，可能有“目的-目的基因”、“目的基因-运载体”、“运载体-运载体”三种，其中有效的（所需要的）重组DNA是目的基因-运载体．
    （3）图（一）所示的质粒中含有tctR为四环素（抗生素）抗性基因，拼接形成的3种拼接产物（重组DNA）与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物必需含有四环素抗性基因，即运载体-运载体、目的基因-运载体．
    （4）据图分析，P为启动子，是RNA聚合酶识别和结合的位点；将重组DNA导入动物受体细胞的常用方法是显微注射法．
    （5）在基因工程中，限制酶（限制性内切酶）能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键，即作用于图（二）的a位置；DNA解旋酶作用于氢键，即b位置．
    故答案为：
    （1）限制酶（限制性内切酶）    DNA连接酶
    （2）目的基因-目的基因   目的基因-运载体   运载体-运载体   目的基因-动载体
    （3）运载体-运载体   目的基因-运载体
    （4）P（启动子）   显微注射法
    （5）限制酶（限制性内切酶）   DNA解旋酶
    点评：本题考查基因工程的相关知识，意在考查学生的识图和解决问题的能力，属于中档题．
    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）．

    （1）图甲中，过程①需要的酶有
     
    ．为达到筛选目的，平板内的固体培养基应加入
     
    ．
    （2）α-淀粉酶基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间的原因是
     
    ．
    （3）除了用选择培养基筛选工程菌之外，还可用DNA杂交技术直接鉴定带有重组质粒的酵母菌．具体操作如图乙所示，结合图乙回答一下问题．

    利用PCR技术制备DNA探针，需加入
     
    才能是DNA探针具有放射性．如何根据放射性自显影结果做出判断
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    将PVY病毒外壳蛋白基因（PVY-CP）导人马铃薯，并使之表达即可获得抗PVY病毒马铃薯．图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作，PVY-CP可以从质粒A中获取；质粒B是选用的运载体，另已知部分限制酶识别序列和切割位点：

    BamH IHindⅢBglIISma I
    G↓GATCC
    CCTAG↑G    		A↓ACCTT
    TTCGA↑A    		A↓GATCT
    TCTAG↑A    		CCC↓GGG
    GGG↑CCC
    请结合图象，运用所学知识回答问题：
    （1）含有PVY-CP的质粒A保存在某细菌群体中，各个细菌含有相关不同的基因，这样的细菌群体称为
     
    ．
    （2）关于步骤②中Klenow酶的猜测，合理的是
     
    ．
    A．催化合成的片段起引物作用       B．可以将DNA片段的粘性末端变成平末端
    C．能催化DNA链的合成             D．与DNA连接酶的功能相同
    （3）步骤④中应该使用的限制酶是
     
    ．
    （4）利用农杆菌转化法进行转化，首先需要将质粒C导人
     
    中，进而转化马铃薯，然后通过
     
    技术获得抗PVY病毒马铃薯苗，最后进行相关的鉴定．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    植物生物反应器是指通过基因工程途径，以常见的农作物作为“化学工厂”，通过大规模种植生产具有重要功能的蛋白，如人或动物的疫苗、抗体、工农业用酶等各种高价值的生物制品的方法．列举几例如下表，请据此回答问题：
    反应器名称 药物名称 作用
    芜菁生物反应器 干扰素 抗病毒
    烟草生物反应器Ⅰ 生长激素 促进生长
    烟草生物反应器Ⅱ 核糖体抑制蛋白 抑制HIV增殖
    番茄生物反应器 狂犬病病毒糖蛋白（G蛋白） 疫苗
    马铃薯生物反应器 人血清白蛋白（HAS） 维持渗透压、pH缓冲、营养等
    （1）从基因工程的角度分析，将目的基因导入植物受体细胞的最常用的方法是
     
    ，运载体是
     
    ，目的基因能在植物体内稳定遗传的关键是
     
    ．在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，分子水平上的检测方法名称是
     
    ．
    （2）从细胞工程的角度分析，建立“化学工厂”的理论基础是
     
    ．从生态学角度考虑操作过程需要
     
    ．
    （3）分析说明烟草生物反应器II生产的药物作用机理是
     
    ．
    （4）从细胞膜的结构和功能上分析，生长激素不能使烟草细胞生长的原因是
     
    ；吃G蛋白基因已有效表达的番茄果实
     
    （能、不能）预防狂犬病．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    烟草在受到烟草花叶病毒的侵染后．产量会大大降低，我国科学家利用基因工程技术成功培育出抗烟草花叶病毒的烟草．下图是转基因烟草培育过程示意图．
    请回答：
    （1）PCR扩增的前提是要有一段已知
     
    的核苷酸序列．以便合成引物I、Ⅱ．
    （2）构建基因表达载体时，需将抗烟草花叶病毒基因插入到Ti质粒的
     
    上，然后通过农杆菌的转化作用．将其插入到烟草细胞的
     
    上，使抗烟草花叶病毒的性状能得以稳定维持和表达．
    （3）图中过程②依据的原理是
     
    ，②过程中细胞增殖的主要方式是
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    将某地当年收获的小麦秸秆剪成小段，于7月20日开始分别进行露天堆放、水泡和土埋3种方式的处理，3次重复，每隔15天检测一次秸秆腐解残留量，结果见如图．下列分析合理的是（　　）
    A、秸秆还田后堆放应是利用秸秆的最合理方法
    B、土壤中的空气和水分条件不利于多种微生物对秸秆的分解
    C、从堆放、水泡2条曲线可以推测好氧性微生物分解能力高于厌氧性微生物
    D、如果将处理开始时间提早30天，则3条曲线的位置将呈现下移趋势

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列有关生物大分子的叙述中，正确的是（　　）
    A、RNA彻底水解的产物是核糖核苷酸
    B、生物体内参与信息传递的信息分子都是激素
    C、DNA分子同一条单链上的碱基A与T通过氢键连接
    D、细胞中不同种类的蛋白质，其氨基酸种类和数量可能相同

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    某水稻的有芒（T）对无芒（t）为显性，在自然情况下水稻可以自由传粉，去掉无芒水稻后，据统计TT：Tt为1：2，在自然情况下，无基因突变，无自然选择，T基因在子一代的基因频率和子二代的基因频率分别是（　　）
    A、
    2
    3
    和
    1
    3
    B、
    2
    3
    和
    2
    3
    C、
    1
    3
    和
    1
    3
    D、
    1
    3
    和
    2
    3

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    某雌（XX）雄（XY）异株植物，其叶形有阔叶和窄叶两种类型，由一对等位基因（位于性染色体上）控制．现有三组杂交实验，结果如下表：
    杂交组合 亲代表现型 子代表现型及株数
    父本 母本 雌株 雄株
    1 阔叶 阔叶 阔叶234 阔叶119、窄叶122
    2 窄叶 阔叶 阔叶83、窄叶78 阔叶79、窄叶80
    3 阔叶 窄叶 阔叶131 窄叶127
    有关表格数据的分析，不正确的是（　　）
    A、根据第1组实验，可以判断两种叶形的显隐性关系，确定叶型基因位于X染色体上
    B、根据第3组实验，可以判断两种叶形的显隐性关系，确定叶型基因位于X染色体上
    C、用第2组的子代阔叶雌株与阔叶雄株杂交，后代性状阔叶与窄叶的分离比为3：1
    D、用第1组子代的阔叶雌株与窄叶雄株杂交，后代窄叶植株占
    1
    2

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