肺细胞中的let-7基因表达减弱.癌基因RAS表达增强.会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达.发现肺癌细胞的增殖受到抑制．该基因工程技术基本流程如图1．研究发现.let-7基因能影响癌基因RAS的表达.其影响机理如图2．请回答下列问题:(1)基因工程的步骤中.过程①为 ,进行� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制．该基因工程技术基本流程如图1．研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2．请回答下列问题：
（1）基因工程的步骤中，过程①为

；进行过程②时，需用

酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于细胞培养．
（2）let一7基因需采用PCR技术扩增时，PCR反应体系的主要成分包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶和引物1和引物Ⅱ等，其中，模板DNA是指

．若在该反应体系中，DNA扩增了5代，则具有引物I的DNA所占的比例理论上为

．
（3）直接检测let一7基因是否转录，可从细胞中提取

进行分子杂交，肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中let一7基因d 转录产物与

结合，从而导致

含量减少引起的．这种基因的表达调控属于

水平的调控．
（4）现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制酶切开后得到仍是长度为1000bp的DNA分子，说明此DNA分子的形态为

．

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：析图1：图1表示利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞的流程，其中①表示基因表达载体的构建过程；②表示用胰蛋白酶处理组织细胞，使之成为单个细胞，再加细胞悬液进行细胞培养的过程．
分析图2：图2表示let-7基因影响癌基因RAS的表达的原理，let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合，使RAS基因翻译受到抑制，引起细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞增殖受到抑制．

解答： 解：（1）图中①表示基因表达载体的构建过程；②表示动物细胞培养过程，该过程中需要胰蛋白酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于细胞培养．
（2）利用PCR技术体外扩增let一7基因时，所需的模板DNA是指 let-7基因．目的基因扩增了5代，共得到32个DNA分子，除了含有模板DNA链的1个DNA分子外，其余的DNA分子都含有引物I，因此具有引物I的DNA所占的比例为

25-1

．
（3）检测目的基因（let一7基因）是否转录，可采用分子杂交技术，即可从细胞中提取RNA进行分子杂交；肺癌细胞增殖受到抑制的原因是：let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合，使RAS基因翻译受到抑制，引起细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞增殖受到抑制．
（4）现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制酶切开后得到仍是长度为1000bp的DNA分子，说明此DNA分子的形态为环状．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建胰蛋白
（2）let-7基因

（3）RNA RASmRNA RAS蛋白质翻译
（4）环状

点评：分析题图：图1表示利用基因工程技术题考查基因工程的原理和技术、遗传信息的转录和翻译的相关知识，要求考生识记基因工程的工具和操作步骤，能分析图1，准确判断各过程的名称；掌握遗传信息的转录和表达过程，能利用图2信息答题．

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