Question

6．分析有关基因工程的资料，回答问题．
如图为构建某重组质粒的过程示意图．lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则成白色．图中甲--戊DNA片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其它碱基的种类未作注明．

（1）若酶M特异性识别的DNA碱基序列是，则酶N特异性识别的DNA碱基序列是．
（2）过程②是将所有片段混合在一起，用DNA连接酶拼接可得到不同的重组DNA．
（3）如果只考虑2个片段的组合，那么甲、乙、丁三个片段中能够形成环状DNA的片段组合是ABCDEF．（多选）
A．甲和乙   B．甲和甲    C．甲和丁    D．乙和乙    E．乙和丁     F．丁和丁
（4）为了筛选含重组质粒的受体菌，应在通用培养基中额外加入青霉素和X-gal，培养一段时间，挑选出白色的菌落进一步培养．原来质粒中，限制酶M和N的酶切位点应该位于D．
A．M位于青霉素抗性基因中，N位于lacZ基因中
B．N位于青霉素抗性基因中，M位于lacZ基因中
C．M和N都位于青霉素抗性基因中
D．M和N都位于lacZ基因中
（5）上述目的基因能够在受体细菌中表达，其原因是不同生物D．
A．共用一套DNA     B．共用一套RNA     C．共用一套蛋白质    D．共用一套密码子．

Answer 1

分析 1、切割DNA的工具是限制性核酸内切酶，又称限制酶，限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列．
2、质粒经过酶M和酶N的切割形成甲、乙片段，根据甲、乙片段的黏性末端可知，两种限制酶的识别序列分布是、，酶M特异性识别的DNA碱基序列是，则酶N特异性识别的DNA碱基序列是．

解答 解：（1）由以上分析可知，酶N特异性识别的DNA碱基序列是．
（2）DNA连接酶可以将具有相同黏性末端的DNA片段连接起来．
（3）甲、乙、丁都有两个黏性末端，且都相同，因此如果只考虑2个片段的组合，那么甲、乙、丁三个片段中任意两个连接都能够连接形成环状DNA．
（4）为了筛选含重组质粒的受体菌，应在通用培养基中额外加入青霉素和X-gal，培养一段时间，挑选出白色的菌落进一步培养．这表明青霉素抗性基因没有被破坏，lacZ基因已经被破坏，因此在原来质粒中，限制酶M和N的酶切位点都位于lacZ基因中．
（5）上述目的基因能够在受体细菌中表达，其原因是不同生物共用一套密码子．
故答案为：
（1）
（2）DNA连接酶
（3）ABCDEF
（4）青霉素和X-gal     白    D
（5）D

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合题中信息准确答题．