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    普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），能在纤维细胞中特异性表达，产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解，棉纤维长度变短．为了培育新的棉花品种，科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体，利用农杆菌转化法导入棉花细胞，成功获得转基因棉花品种，具体过程如下．（启动子是基因的一个组成部分，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性．）请分析回答：
    （1）①和②过程中所用的限制性内切酶分别是
     
    、
     
    ．
    （2）③过程中用酶切法可鉴定正、反义表达载体．用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切正义基因表达载体获得0.05kb、3.25kb、5.95kb、9.45kb四种长度的DNA片段，则用NotⅠ酶切反义基因表达载体可获得
     
    种长度的DNA片段，长度分别是
     
    ．
    （3）导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而抑制基因的表达，其意义是
     
    ．
    考点：基因工程的原理及技术
    专题：
    分析：分析题图：图示为转基因棉花的培育过程．①是纤维细胞E6启动子和质粒1形成重组质粒2的过程；②是重组质粒2和β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2）形成正义表达载体和反义表达载体的过程；③是扩增、鉴定、筛选出反义表达载体导入农杆菌细胞的过程；④利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程；最后再采用植物组织培养技术获得转基因棉花植株．
    解答： 解：（1）纤维细胞E6启动子两侧是限制酶HindⅢ和BamHⅠ的切割位点，且用这两种限制酶切割可以去除花椰菜病毒启动子，因此过程①中所用的限制性内切酶是HindⅢ、BamHⅠ；β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2）两侧都是限制酶SmaⅠ的切割位点，因此②中所用的限制性内切酶是SmaⅠ．
    （2）正、反义基因表达载体总长度相等，NotⅠ酶切位点在目的基因中的位置不一样，因此只用NotⅠ酶切反义基因表达载体可获得两种长度的DNA片段，即5.95+0.05=6.0kb、9.45+3.25=12.7kb．
    （3）因为在普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），能在纤维细胞中特异性表达，产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解，棉纤维长度变短．而导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与棉花细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而抑制基因的表达，其意义是阻止β-甘露糖苷酶合成，使棉纤维更长．
    故答案为：
    （1）HindⅢ、BamHⅠSmaⅠ
    （2）2     6.0kb、12.7kb
    （3）阻止β-甘露糖苷酶合成，使棉纤维更长
    点评：本题结合转基因棉花的培育过程图，考查基因工程、植物组织培养等知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，能根据图中信息选择正确的限制酶；掌握限制酶的作用特点，能运用所学的知识结合题图答题．
    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    现代生物科技对人类生活、生产和社会发展的影响越来越大，下图是利用生物工程技术让羊生产治疗心脏病药物tPA的大致过程．请据图回答：

    （1）一个基因表达载体的组成，通常有外源基因、
     
    、
     
    、
     
    等．
    （2）图中②过程选择受精卵作为tPA基因受体细胞的主要原因是受精卵
     
    ；受体细胞除受精卵外，还可以是胚胎干细胞．
    （3）图中③的受体母羊事先应接受
     
    处理．胚胎移植能否成功，与供受体的生理状况有关：早期胚胎形成后一定时间内处于
     
    ，为胚胎的收集提供了可能；受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生
     
    ，为胚胎在受体内的存活提供了可能；而且供体胚胎可与受体子宫建立正常的
     
    ，但移入受体的胚胎的遗传特性不受任何影响．
    （4）要扩大转基因羊群，除了让转基因羊进行有性杂交外，还可采取通过细胞核移植技术转基因羊进行克隆和通过胚胎分割技术将符合要求（即含基因）的早期胚胎进行克隆，对胚胎进行分割时，要特别注意将
     
    ，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育．在胚胎分割前，若要做DNA分析性别鉴定，通常取样
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列关于运载体的叙述中，错误的是（　　）
    A、与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子
    B、质粒是一种独立于细菌染色体外的链状DNA分子
    C、目前最常用的有质粒、噬菌体和动植物病毒
    D、作为运载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA分子进行鉴定和选择的标记基因

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    基因工程基本操作流程如图，请据图分析回答．
    （1）在基因工程的操作过程中，遵循碱基互补配对原则的步骤可能有
     
    （用图解中的序号表示）
    （2）下列属于基因表达载体组成的是
     

    A．目的基因      B．终止密码
    C．启动子        D．标记基因
    E．终止子        F．起始密码
    （3）可用
     
    方法将目的基因导入动物细胞．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    基因工程基本操作流程如图，请据图分析回答：
    （1）图中A是
     
    ．
    （2）在上述基因工程的操作过程中，一定遵循碱基互补配对原则的步骤有
     
    ．（填图中序号）
    （3）图中的步骤
     
    是基因工程的核心，其目的是使目的基因在受体细胞中
     
    ，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用．
    （4）从分子水平分析，不同种生物之间的基因能成功拼接主要理论依据是
     
    ，能够成功表达说明了生物共用一套
     
    ．
    （5）转基因玉米获得后，公众在食物安全、生物安全和环境安全方面产生了争议．食物方面公众主要担心转基因生物会产生
     
    ．
    （6）利用蛋白质工程技术对植酸酶进行改造，使其具有较好的高温稳定性时，首先必须了解植酸酶的
     
    ，然后改变植酸酶肽链的
     
    序列，从而得到新的植酸酶．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    请回答下列有关现代生物科技的问题：
    （1）培育“乳腺反应器”动物的一个重要环节是获得控制特定药物合成的目的基因．获得人α-抗胰蛋白酶基因的常用方法是从人的细胞获得控制α-抗胰蛋白酶合成的mRNA，然后在
     
    酶的催化作用下合成α-抗胰蛋白酶基因，经过
     
    技术获得大量α-抗胰蛋白酶基因．
    （2）科学家将外源基因导入绵羊的受精卵中，常用的方法是
     
    ．由于外源基因可能随机插入到受精卵的DNA中，因而有时会导致早期胚胎死亡，最可能原因是
     
    ．
    （3）从早期胚胎或原始性腺分离出来的一类体积小、核大具有发育的全能性的细胞是
     
    ．
    （4）若要获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到桑椹期或囊胚期阶段的早期胚胎进行
     
    处理，经过“最后一道工序”
     
    ，植入到受体母绵羊体内．
    （5）我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究，可以减少农药、杀虫剂的使用，这将对
     
    起到重要作用．生态工程所遵循的基本原理有物质循环再生、整体性、
     
    、
     
    与系统学和工程学原理等原理．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    培育优质高产的农作物一直是科学家所追求的目标，传统的育种方法虽已培育出了许多新品种，但是存在很大的缺陷．科学家利用基因工程技术将细菌的毒蛋白基因（Bt）导入棉花，成功培育出了抗虫棉．请回答：
    （1）与传统育种方法相比，转基因棉的培育是突出的优点是
     
    ，细菌的毒蛋白基因（Bt）能够在棉花植株体内成功表达，其理论基础是
     
    ．
    （2）从细菌中获取毒蛋白基因（Bt）后，用DNA连接酶将毒蛋白基因和Ti质粒连接成重组质粒，先导入
     
    中，然后用它去侵染离体的棉花叶片组织，再通过
     
    培育出抗虫棉．
    （3）目的基因的检测与鉴定是基因工程的重要环节．用
     
    法可以在分子水平上检测是否翻译成了相应蛋白质．亦可在个体水平进行实验，若仍不抗虫，则必须再对进行改造或修饰，重新进行基因工程的操作．
    （4）抗虫棉的培育过程所遵循的原理有
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    将目的基因导入植物细胞的方法不包括（　　）
    A、农杆菌转化法
    B、显微注射法
    C、花粉管通道法
    D、基因枪法

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    细胞核的功能是
     
    、
     
    ．

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