Question

【题目】【生物——选修3：现代生物科技专题】

人外周血单核细胞能合成白介素2(IL～2)。该蛋白可增强机体免疫功能，但在体内易被降解。研究人员将IL－2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有IL－2生理功能、且不易降解的IL－2－HSA融合蛋白。其技术流程如图。请回答下列问题。

(1)培养人外周血单核细胞需要无菌、无毒的环境，为防止培养过程中的污染，通常要在细胞培养液中添加一定量的_____；为保证营养充足，通常要在细胞培养液中添加_____；除提供适宜培养温度和pH外，还需适宜气体环境，通常将培养皿置于含_____的混合气体培养箱中进行培养。

(2) 图中②表示________过程，图中③表示________过程。

(3) 表达载体1中的位点________，应为限制酶BglⅡ的识别位点，才能成功构建表达载体2。表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与IL－2蛋白对应的碱基序列不能含有________(起始、终止)密码子，才能成功表达出IL－2－HSA融合蛋白。

(4)应用____________杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL－2－HSA融合蛋白。IL－2－HSA融合蛋白从酵母菌细胞中排出，需要酵母菌细胞中_________（细胞器）的加工。

Answer 1

【答案】(1)抗生素（1分） 血清或血浆（1分） 95%空气加5%CO2（1分） (2) 反(或逆)转录（2分） 构建表达载体（2分） (3) a （2分） 终止（2分） (4)抗原—抗体（2分） 内质网和高尔基体（2分）

【解析】（1）培养基添加抗生素可以防止污染；动物细胞培养时通常加入血清或血浆； 95%空气加5%CO2是细胞培养的气体环境，空气提供细胞呼吸的氧气，二氧化碳维持培养液的PH；

（2）②表示由mRNA到cDNA的过程，属于逆转录；③过程表示目的基因与运载体结合，属于构建基因表达载体；

（3）切割目的基因的限制酶应和切割运载体相同，切割目的基因右侧的限制酶为BglⅡ，故a为BglⅡ的识别位点；起始密码子代表氨基酸，终止密码不代表氨基酸，故蛋白中没有终止密码子对应序列；

（4）检测蛋白质是否表达成功应用抗原—抗体杂交技术；L－2－HSA融合蛋白属于分泌蛋白，参与分泌蛋白的加工的细胞器是内质网和高尔基体。