Question

【题目】如图为某质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点．又知植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关．若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性．已知耐旱基因两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点．据图回答：

（1）获得耐旱基因常用基因文库法．理论上，_________________（填基因文库种类）中含有该生物的全部基因；而_________________（填基因文库种类）中含有生物的部分基因．将含有耐旱基因的DNA与该质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶处理后，两两连接的产物有_________种。

（2）将上述连接产物导入无任何抗药性的宿主细胞后，将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能正常生长的宿主细胞所含有的连接产物是___________________________。

（3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是_______________，其合成的产物是_______________。

（4）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是_______________。

（5）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱植株与不耐旱植株的数量比为3：1时，则可推测该耐旱基因整合到了_______________________（填“同染色体的一条上”或“同染色体的两条上”）。

Answer 1

【答案】 基因组文库 cDNA文库 3（或6） 载体-载体连接物（或质粒-质粒连接物） 启动子 mRNA EcoRⅠ和BamHⅠ 同染色体的一条上

【解析】试题分析：

（1）基因组文库中含有该生物的全部基因，cDNA文库中含有生物的部分基因。将含有耐旱基因的DNA与该质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶处理后，两两连接的产物有：目的基因-载体连接物、质粒-质粒连接物、目的基因-目的基因连接物（或包括这3种连接顺序相反的另三种），故是3（或6）种。

（2）能正常生长的宿主细胞所含有的连接产物是载体-载体连接物（或质粒-质粒连接物），保证了tctR——四环素抗性基因的完整，并能正常表达。

（3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点在DNA上，是启动子，其合成的产物是mRNA。

（4）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ。

（5）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱植株与不耐旱植株的数量比为3：1时，则可推测该耐旱基因整合到了同染色体的一条上，相当于一对基因的杂合体自交。