Question

【题目】重组人血小板生成素（rhTPO)是一种新发现的造血生长因子，如图为通过乳腺生物发生器产生rhTPO的相关过程。请回答下列问题。

（1）构建重组质粒时选用的限制酶是____________，原因是__________________。重组质粒中的标记基因是___________，标记基因的作用是_________________________。

（2）通常采用__________技术将重组质粒导入受精卵，图中所示的过程与胚胎工程相关的有_________(至少写出两个）。

（3）若检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，检测方法是___________技术，其次还需检测目的基因____________，这是检测目的基因是否发挥作用的第一步，最后检测目的基因是否翻译成蛋白质。

Answer 1

【答案】 HindⅢ和XhoⅠ SmaⅠ的酶切位点位于目的基因中间，如果用SmaⅠ切割，不能得到完整的目的基因（或用HndⅢ和XhoⅠ可以得到完整的目的基因) 抗卡那霉素基因 鉴别受体细胞中是否含有目的基因，以便筛选 显微注射 体外受精、早期胚胎培养(动物细胞培养）、胚胎移植 DNA分子杂交 是否转录出mRNA

【解析】本题结合图形考查基因工程和胚胎工程，要求考生理解相关知识的要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力。

（1）结合题意分析图形可知，构建重组质粒时选用的限制酶是HindⅢ和XhoⅠ，原因是SmaⅠ的酶切位点位于目的基因中间，如果用SmaⅠ切割，不能得到完整的目的基因，而用HndⅢ和XhoⅠ可以得到完整的目的基因；同时用HndⅢ和XhoⅠ还可以保证切割后的目的基因与质粒具有相同的末端，以便于在DNA连接酶的作用下形成重组质粒。由于使用HndⅢ和XhoⅠ切割质粒是会破坏质粒中的抗四环素基因而不会破坏抗氨苄青霉素基因，因此重组质粒中的标记基因是抗卡那霉素基因，标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，以便筛选。

（2）动物基因工程中，通常采用显微注射技术将重组质粒导入受精卵；图中所示的过程与胚胎工程相关的有体外受精、早期胚胎培养(动物细胞培养）、胚胎移植。

（3）若检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，检测方法是DNA分子杂交技术，其次还需检测目的基因是否转录出mRNA，这是检测目的基因是否发挥作用的第一步，最后检测目的基因是否翻译成蛋白质。