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    科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达．但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选．已知限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-，据图回答：

    （1）图1过程①所需要的酶是
     
    ．
    （2）在构建基因表达载体过程中，应用限制性核酸内切酶
     
    切割目的基因，用限制性核酸内切酶
     
    切割质粒．用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过
     
    原则进行连接．人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是
     
    ．
    （3）在过程③一般将受体大肠杆菌用
     
    处理，以增大
     
    的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞．
    （4）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上得到如图2中a的结果（黑点表示菌落），能够生长的细菌中已导入了
     
    ，反之则没有导入；再将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图2中b的结果（空圈表示与a对照无菌落的位置）．与图2中b空圈相对应的图2的a中的菌落表现型是
     
    ，这些细菌中导入了
     
    ．
    （5）人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为
     
    ．
    考点：基因工程的原理及技术
    专题：
    分析：获得目的基因的方法：①从基因文库中获取 ②利用PCR技术扩增 ③人工合成（化学合成）．据图分析可知，人的生长激素基因是人工合成的，采取的方法是利用人的生长激素基因的mRNA为模板，进行反转录．
    目的基因能插入宿主DNA，与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是它们的成分和结构相同，都是由四种脱氧核苷酸组成的双螺旋结构．所有的生物都共用一套密码子，所以人体的生长激素基因能在细菌体内的核糖体上成功表达．
    将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，因质粒上有抗氨苄青霉素基因，且重组质粒上的抗氨苄青霉素基因，也没有被破坏，所以如果大肠杆菌B能够生长，说明已导入了含抗氨苄青霉素基因的普通质粒或重组质粒，反之则没有导入．
    解答： 解：（1）过程①是以mRNA为模板形成基因的过程，属于反转录，此过程需要逆转录酶的参与．
    （2）在构建基因表达载体时，需用限制酶对目的基因和质粒进行切割以形成相同的黏性末端．质粒如果用限制酶Ⅱ来切割的话，将会在质粒在出现两个切口且抗生素抗性基因全被破坏，故质粒只能用限制酶Ⅰ切割（破坏四环素抗性而保留氨苄青霉素抗性，即将来形成的重组质粒能在含氨苄青霉素的培养基中生存，而在含四环素的培养基中不能生存）；目的基因两端都出现黏性末端时才能和质粒发生重组，故目的基因只有用限制酶Ⅱ切割时，才会在两端都出现黏性末端．黏性末端其实是被限制酶切开的DNA两条单链的切口，这个切口上带有几个伸出的核苷酸，它们之间正好通过碱基互补配对进行连接．来源不同的DNA之所以能发生重新组合，主要原因是两者的结构基础相同，都是双螺旋结构，基本组成单位都是脱氧核苷酸等．
    （3）在目的基因导入微生物细胞时，一般用CaCl2处理，以增大细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞．
    （4）因本题上有2个标记基因，但抗四环素基因被插入的基因破坏掉，因此剩下的是抗氨苄青霉素抗性基因，如果在含氨苄青霉素的培养基上能生长，说明已经导入了重组质粒或普通质粒A，因为普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因．与图2中b空圈相对应的图2的a中的菌落表现型是抗氨苄青霉素但不抗四环素，说明这些细菌中导入了重组质粒．
    （5）所有的生物都共用一套密码子，所以人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达．
    故答案为：
    （1）逆转录酶
    （2）ⅡⅠ碱基互补配对    人的基因与大肠杆菌DNA都是由两条脱氧核苷酸链组成的规则双螺旋结构
    （3）CaCl2 细胞壁
    （4）普通质粒或重组质粒   抗氨苄青霉素但不抗四环素   重组质粒   
    （5）不同生物共用一套密码子
    点评：本题结合转基因大肠杆菌的培育过程图，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的工具及作用；识记基因工程的操作步骤及各步骤采用的方法和注意事项，能结合图中信息答题．
    练习册系列答案
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    从生态系统的组成成分看硝化细菌和蚯蚓属于（　　）
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    A、Fe、Mn、Zn、Cu
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    D、Mg、H、C、Mo

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    下列关于核酸的叙述正确的是（　　）
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    C、在绝大多数生物细胞中，RNA由两条链构成，DNA由一条链构成
    D、核酸彻底水解的产物是核苷酸

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列有关核酸的叙述，不正确的是（　　）
    A、核酸是由C、H、O、N、P等元素组成
    B、核酸的基本组成单位是氨基酸
    C、核酸存在于细胞核和细胞质中
    D、核酸有DNA和RNA两种

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    如图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的有关资料．图中质粒表示基因工程中经常选用的载体--pBR322质粒，Amp表示青霉素抗性基因，Tet表示四环素抗性基因．根据如图回答下列问题（限制酶Pst，1、EcoR1和HindⅢ切割形成的末端均不相同）；

    （1）过程②需要
     
    酶，得到的cDNA一般比从基因组文库中获得的目的基因要小的多，原因是
     
    ．过程④需要
     
    酶，过程⑤中要提高成功率，常用
     
    处理大肠杆菌．
    （2）如果用限制酶Pst、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒-pBR322进行切割，用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时，则形成的DNA片段共
     
    种．
    （3）基因表达载体除了目的基因和抗性基因外，至少还有
     
    等（至少答两个）．
    （4）如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322，完成过程④⑤后，将三角瓶内的大肠杆菌（不含Amp′、Tet′抗性质粒）先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示．接种到甲培养基上的目的是筛选
     
    的大肠杆菌，含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态是
     
    、
     
    ，也可以用
     
    方法进行检测．
    （5）酵母菌细胞也常常作为基因工程的受体细胞，与大肠杆菌等细胞相比，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行
     
    并分泌到细胞外，便于提取．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    动物体内，在细胞之间传递信息的一组化学物质是（　　）
    A、抗体、信使RNA
    B、激素、神经递质
    C、淀粉酶、解旋酶
    D、DNA、RNA

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    如果做一个实验测定藻类植物是否完成光反应，最好是检测其（　　）
    A、葡萄糖的形成
    B、淀粉的形成
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