Question

【题目】小鼠是继果蝇之后的又一种模式动物，下图1表示生产长效胰岛素转基因小鼠培育过程示意图，图2表示图1中③表达载体构建过程图示。请回答下列问题：

（1）图1中的过程①注射A物质的目的是使供体母鼠__________________，若进行体外受精，则需将未成熟的卵子培养至_______________才具备受精能力。

（2）在图2中，当目的基因的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后反应管中有________种DNA片段，经过程⑧形成的重组质粒上将有______________限制酶的切点。

（3）为确保目的基因在小鼠细胞中进行表达，图2的⑧过程在构建基因的表达载体时，需将目的基因插在____________________之间，将表达载体送入细胞时，图1中的过程④常用的方法是__________________。

（4）为检测是否含有目的基因，通常采用的方法是______________。为检测目的基因是否成功表达，通常采用的方法是____________________。

Answer 1

【答案】（1）超数排卵 减数第二次分裂中期（或MⅡ中期）

（2）4 HindⅢ（或1种）

（3）启动子、终止子 显微注射法

（4）DNA分子杂交技术 抗原-抗体杂交技术

【解析】

试题分析：（1）分析图1可知：过程①注射的A物质是促性腺激素，其目的是使供体母鼠超数排卵；进行体外受精时，未成熟的卵子需培养至减数第二次分裂中期（或MⅡ中期）才具备受精能力。

（2）在图2中，目的基因的DNA含有1个HindⅢ酶切位点，2个BamHⅠ酶切位点，因此当该目的基因的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后反应管中有4种DNA片段。用限制酶HindⅢ酶、BamHⅠ切割获得目的基因，用限制酶HindⅢ酶、BclⅠ切割获得质粒，因BamHⅠ和BclⅠ酶切获得的黏性末端相同，因此经过程⑧形成的重组质粒上将有HindⅢ的切点，没有BamHⅠ和BclⅠ的切点。

（3）为确保目的基因在小鼠细胞中进行表达，图2的⑧过程在构建基因的表达载体时，需将目的基因插在启动子和终止子之间，将表达载体导入动物细胞常用的方法是：显微注射法。

（4）为检测是否含有目的基因，通常采用DNA分子杂交技术；为检测目的基因是否成功表达，通常采用的方法是抗原-抗体杂交技术。