Question

【题目】[生物—选修1：生物技术实践]

如图是从土壤中筛选细菌的过程。请回答下列问题：

（1）土壤中存在能分解尿素的细菌，这些细菌之所以能将尿素分解，是因为能合成_________。因此，图中选择培养基应以_________为唯一氮源。鉴别培养基还需添加______________作指示剂。

（2）若要从土壤中分离大肠杆菌，培养基中应加入牛肉膏、蛋白胨、NaCl、水和琼脂，其中作为碳源的是_____________；鉴别培养基中也需添加某些特定物质，根据培养基菌落的颜色变化来判断是否分离得到大肠杆菌，请简述鉴别大肠杆菌的方法：_________________。

（3）土霉素是一种可以治疗人类感染性疾病的抗生素类药物，可从土壤中放线菌的发酵产物中提取，但土壤中放线菌数目较少，可在逐级稀释前使用________（从培养基的物理状态和功能分析）培养基进行选择培养，以增加目的菌的数目。分析可知，土霉素易溶于有机溶剂，且是___________（填“挥发性”或“非挥发性”）物质，故可使用萃取法从放线菌中提取。萃取得到的样品可用纸层析法进行鉴定，用显色剂显色后结果如下图所示，点样时，A、D点是__________。

图2

Answer 1

【答案】 脲酶 尿素 酚红 牛肉膏、蛋白胨 在培养基中添加伊红美蓝，若再培养基上出现黑色菌落，则说明有大肠杆菌，反之，则没有 液体、选择 非挥发性 土霉素标准样品点

【解析】

图1所示过程从土壤中筛选能高效降解尿素的细菌，实验流程：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。培养基是指人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。其中能够为微生物的生长提供C元素的物质是碳源，提供氮元素的物质是氮源。据此答题。

（1）能合成脲酶的细菌才能分解尿素。因此配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的鉴别培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。

（2）分离大肠杆菌的培养基为牛肉膏蛋白胨培养基，其中的牛肉膏、蛋白胨既含有碳元素又含有氮元素，可作为碳源和氮源，鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。利用鉴别培养基鉴别大肠杆菌的方法是：在培养基中添加伊红美蓝，若在培养基上出现黑色菌落，则说明有大肠杆菌，反之，则没有。

（3）由于土壤中放线菌数目较少，因此分离该菌前需要扩大培养，即增加溶液中放线菌的浓度，可选用液体、选择培养基进行培养。土霉素是一种易溶于有机溶剂、难溶于水且非挥发性的物质，可用萃取的方法进行提取。据图2可知，在A、B、C、D四点中，A、D代表的是土霉素标准样品点。