Question

下列是基因工程的有关问题，请回答：
（1）限制性核酸内切酶可以识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列，并可以使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的

 

（填化学键名称）断裂，形成的末端总体可分为两种类型，分别是

 

．
（2）目的基因和运载体重组时需要的工具酶是

 

，和限制性核酸内切酶相比，它对所重组的DNA两端碱基序列

 

（有或无）专一性要求．
（3）图1表示构建表达载体时的某种质粒与目的基因．已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓CATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓GATC-．

分析可知，最好选择限制酶

 

切割质粒，限制酶

 

切割目的基因所在的DNA，这样做的好处分别是

 

、

 

．
（4）人的肤色正常与白化病受常染色体上基因A和a控制．若白化病基因与相对应的正常基因相比，白化病基因缺失了一个限制酶的切点，甲、乙、丙3人白化基因或相对应正常基因的核酸分子杂交诊断结果如图2．
由图2可以判断出，乙和丙的基因型分别是

 

、

 

．如果甲与丙婚配，后代患病的概率为

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：1、限制性核酸内切酶（限制酶）
（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的．
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端．
2、DNA连接酶
（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T₄DNA连接酶．
这二者都能连接黏性末端，此外T₄DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低．
（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．

解答： 解：（1）限制性核酸内切酶（限制酶）能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端．
（2）目的基因和运载体重组时需要DNA连接酶连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键．它对所重组的DNA两端碱基序列无专一性．
（3）图1中显示，已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓CATCC-，酶Ⅰ切割质粒不会把两个标记基因都破坏，最好选择限制酶I切割质粒．限制酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓GATC-，目的基因两端均有酶Ⅱ的识别序列，限制酶II切割目的基因所在的DNA．
（4）由图2可以判断出，甲、乙和丙的基因型分别是Aa、AA、aa．如果甲与丙婚配，后代患病的概率为

1

2

故答案为：
（1）磷酸二酯键   粘性末端和平末端
 （2）DNA连接酶  无
（3）酶Ⅰ酶Ⅱ酶Ⅰ切割质粒不会把两个标记基因都破坏     目的基因两端均有酶Ⅱ的识别序列
（4）AA   aa   1/2

点评：本题着重考查了基因工程原理和技术的有关知识，意在考查考生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成一定知识网络的能力，并且具有一定的分析能力和理解能力．