Question

【题目】以下是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。

（1）上图中过程①的完成采用的方法有 ，依据的生物学原理 ；

（2）过程④要用到的酶是 ，过程⑥进行时一般用 处理细胞，使其处于 。

上图中的质粒本身含有氨苄青霉素抗性基因和M、N两种限制酶（两种酶切割序列完全不同）切割位点。若用限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离，分析得如下表。

分子量（kb）	1．0	2．0	3．0	4．0	5．0	6．0	7．0	8．0	9．0	10．0
酶M	+	+	+
酶N	+	+
酶M+酶N	+	+	+	+	+

凝胶电泳结果（１kb=1000对碱基，+表示检测到该片段的存在

（3）该质粒长度为 kb，在该质粒中，M酶与N酶的切割点分别有 、 个。

（4）氨苄青霉素抗性基因的作用是 。

（5）在表达载体中，启动子的作用是 识别和结合的部位，驱动V1基因的转录。

Answer 1

【答案】（1）用聚乙二醇（PEG）（灭活的病毒） 细胞膜具有流动性

（2）逆转录酶 钙离子 感受态

（3）16 3 2

（4）作为标记基因（鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的受体细胞筛选出来）

（5）RNA聚合酶

【解析】

试题分析：（1）诱导动物细胞融合的方法有三种：生物方法（灭活的病毒）、化学方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（离心，震动，电刺激），其原理是细胞膜的流动性；

（2）过程④是逆转录，要用到的酶主要有逆转录酶、DNA聚合酶；将基因表达载体导入大肠杆菌之前，一般要先用Ca2+处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为感受态细胞，这种方法就称为感受态法；

（3）M酶将质粒切成三段，分别为1kb、5kb、10kb，因为质粒为环状DNA，要切成三段就一定要有三个切点，共有16kb；N酶将质粒切成二段，分别为7kb、9kb，应有二个切点，共有16kb；

（4）氨苄青霉素抗性基因在基因工程作为标记基因，用来鉴别和筛选含有目的基因的细胞；

（5）在表达载体中，启动子的作用是使RNA聚合酶与启动子结合，驱动V1基因转录出mRNA。