Question

【题目】甲、乙两位同学从实际出发着手准备如下实验。甲同学想从土壤中分离出自生固氮菌（一类能独立固定氮气的细菌）。查阅资料得知, 细菌的直径大小通常在0.5~5μm之间，某针筒式微孔过滤器（滤膜孔径0.22微米，如图），耐热性稳定。乙同学想充分利用当地的特有资源——柠檬来提取柠檬精油，查阅资料得知柠檬精油是挥发性物质。回答下列问题：

（1）从甲同学查阅的资料进行思考，如何配制含有不耐高温药品A的无菌培养液？________________（在无菌环境中操作）。

（2）甲同学进行富集培养时，为达到筛选自生固氮菌的目的，在配制培养液时不应添加_________营养物质。培养时要将装有培养液的锥形瓶放置在摇床上，其目的是提高培养液中的_____________，同时使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。进行分离、纯化培养时，要先将培养基倒入培养皿中，制成平板。如何判断所制作的平板没有被微生物污染？_____________。

（3）乙同学想通过水中蒸馏法提取柠檬精油，可以吗？___________________。请你说出理由：________________________。

Answer 1

【答案】 将溶解好的A溶液通过灭菌的针筒式微孔过滤器滤去微生物后，取适量加入到灭菌的培养液中，摇匀即可 含氮物质（氮源） 溶解氧 待平板冷凝后，置于恒温箱中1﹣2天，没有长出微生物的是符合无菌要求的平板 不可以 水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题

【解析】试题分析：据图分析，某针筒式微孔过滤器的滤膜孔径为0.22微米，而题干信息显示细菌的直径大小通常在0.5~5μm之间，因此通过该针筒式微孔过滤器后可以除去细菌，获得无菌培养液。

（1）根据以上分析可知，为了获得含药品A的无菌培养液，应该通过图示针筒式微孔过滤器，即将溶解好的A溶液通过灭菌的针筒式微孔过滤器滤去微生物后，取适量加入到灭菌的培养液中，摇匀即可。

（2）自生固氮菌具有固氮能力，其培养基中不需要加入氮源，而其他微生物没有固氮能力，因此用不含氮元素的培养基可以筛选出自生固氮菌。将装有培养液的锥形瓶放置在摇床上，可以增加培养液中的溶解氧的含量，促进菌种的有氧呼吸，同时还能够使菌体与培养液充分接触，以提高营养物质的利用率。若要判断制作的平板是否被微生物污染，应该不接种菌种，观察平板上的微生物菌落情况，即待平板冷凝后，置于恒温箱中1﹣2天，没有长出微生物的是符合无菌要求的平板。

（3）水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题，因此不能通过水中蒸馏法提取柠檬精油。