[题目]下图表示培育能产生人生长激素的工程菌的基本过程.图中pBR322是大肠杆菌的一种质粒.Ampr表示氨苄青霉素抗性基因.Tetr表示四环素抗性基因,BamHI位点酶切是一种限制酶,A.B是含有特定抗生素的培养基.目的基因如果插入某抗性基因中.将使该基因失活.而不再具有相应的抗性.为了筛选出运载体导入原本没有Ampr 和Tetr� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】下图表示培育能产生人生长激素的工程菌的基本过程。

图中pBR322是大肠杆菌的一种质粒，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因；BamHI位点酶切是一种限制酶；A、B是含有特定抗生素的培养基。目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。为了筛选出运载体导入原本没有Ampr 和Tetr的大肠杆菌（受体细胞），首先将大肠杆菌培养在通用培养基上，再将其菌落原位转移到A、B培养基上培养（如图中④），得到如图结果：黑点表示菌落，A中空圈表示B的菌落在A中不能生长的位置。据此分析并回答：

（1）“pBR322”的化学本质是________，在自然情况下可通过________过程进行扩增。

（2）左图中过程①表示的获得目的基因的方法是___________，过程②中DNA连接酶的作用是______________________。过程③是__________________________________________ 。

（3）根据用途，左图中A、B所用培养基属于__________。所需大肠杆菌的菌落位于_____上（选填“A”或“B”），理由是_______________________________________________________。

（4）基因工程的理论基础是中心法则，根据图遗传信息表达可用公式(图解)表示为________________________________________________。

（5）若氨基酸的平均相对分子质量为128，则图中以③片段为模板合成的①的相对分子质量为_______。

（6）下列是几种搭配的密码子，据此推断图中合成的多肽，其前三个搭配的种类(按前后顺序排列)_________________________。［甲硫氨酸(AUG)、甘氨酸(GGA)、丝氨酸(UCU)、酪氨酸(UAC)、精氨酸(AGA)、丙氨酸(GCU)］

【答案】DNA 自我复制从生物体细胞中分离将目的基因与运载体结合形成重组DNA 将重组质粒导入受体细胞选择培养基 B 导入目的基因后四环素抗性基因被破坏，重组质粒中应该只含氨苄青霉素抗性基因，所以能在B存活但不能在A存活的说明含有重组质粒 458 甲硫氨酸、丙氨酸、丝氨酸

【解析】

分析题图：图示为培育能产生人生长激素的工程菌的基本过程，其中过程①表示从生物体细胞中分离获得目的基因；过程②中DNA连接酶的作用是将目的基因与运载体结合形成重组DNA。过程③是将重组质粒导入受体细胞。过程④表示筛选。

（1）“pBR322”是一种质粒，其化学本质是DNA；在自然情况下，质粒可通过自我复制过程进行扩增。

（2）由图可知，过程①表示从生物体细胞中分离获得目的基因；过程②中DNA连接酶的作用是将目的基因与运载体结合形成重组DNA；过程③是将重组质粒导入受体细胞。

（3）图1中A、B培养基的目的是筛选含有重组质粒的大肠杆菌，属于选择培养基。在构建基因表达载体时，四环素抗性基因已经被破坏，但氨苄青霉素抗性基因完好，因此导入重组质粒的大肠杆菌能在含有氨苄青霉素的培养基上生存，但不能在含有四环素的培养基上生存，所以所需大肠杆菌的菌落位于B上。

（4）遗传信息表达过程为：。

（5）若氨基酸的平均相对分子质量为128，则图中以③片段为模板合成的①的相对分子质量=4×128-3×18=458。

（6）据此推断图中合成的多肽，其前三个搭配的种类为甲硫氨酸(AUG)、丙氨酸(GCU)、丝氨酸(UCU)。

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材料用具：保温桶、温度计、活性干酵母、质量浓度0.1g/mL的葡萄糖溶液、质量浓度0.1g/mL煮沸后冷却的葡萄糖溶液、0.5%的BTB溶液、带有与管口2配套的橡胶管和弯玻璃导管3套、1cm×15cm的试管若干（假设试管固定在铁架台上）．

实验假设一：酵母菌在有氧条件下呼吸作用比无氧条件下呼吸作用放出热量更多

（1）取A、B两装置设计实验如下，请补充下表中内容：

装置	步骤一	步骤二	步骤三
A	加入240ml的葡萄糖溶液	加入10g活性干酵母	①_____
B	②_____	加入10g活性干酵母	关紧阀a

（2）B装置关紧阀a的目的是为了_____．对B装置中②处理的主要目的是_____，以排除葡萄糖溶液因素对实验效果的干扰。

（3）要准确测定B装置因呼吸作用引起的温度变化量，还需要增加一个装置C．请写出装置C的实验步骤：

装置	步骤一	步骤二	步骤三
C	同B装置②	③_____	关紧阀a

（4）本实验的观察指标是_____．实验预期：在适宜条件下实验，30分钟后记录实验结果，若装置A、B、C观察指标大小关系是：_____（用“＜、＝、＞”表示），则假设成立。

实验假设二：酵母菌在有氧条件下呼吸作用比无氧条件下呼吸作用放出CO2更多。

（5）请根据实验提供的材料用具，用文字形式描述怎样对上述实验装置进行进一步的完善．（只写一套）_____。

（6）若假设成立，请你对装置A、B中预期会观察得到的实验现象加以描述．_____。

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