Question

【题目】牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30 000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。

（1）培养基中的蛋白胨可以为微生物主要提供________________（填两个），对培养基常采用________________法进行灭菌。

（2）图中步骤①称为________________消毒法。步骤②是________________，若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可釆用的接种方法是________________。

（3）将接种后的培养基和作为对照的________________同时放入37 ℃恒温培养箱中，培养36小时。为避免培养基污染，需将培养皿呈________________状态放置。取出后统计各平板的菌落数，菌落数分别为 87、 85 和83，细菌数大约是________________/mL。

Answer 1

【答案】碳源、氮源(和维生素)高压蒸汽灭菌巴氏系列稀释(或梯度稀释)稀释涂布平板法一个未接种的培养基倒置85000个

【解析】

本题以“牛奶消毒及细菌检测实验”的示意图为情境，综合考查学生对微生物的实验室培养、以及菌种的分离和计数等相关知识的识记和理解能力。

(1)培养基中的蛋白胨可以为微生物的生长提供碳源、氮源(和维生素)。常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。

(2)图中步骤①利用80℃、15min对牛奶进行消毒，此种方法称为巴氏消毒法；步骤②是系列稀释（或梯度稀释）。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可釆用步骤③所示的稀释涂布平板法对目的菌进行接种。

(3)将接种后的培养基和作为对照的—个未接种的培养基同时放入37℃恒温培养箱中培养36小时。在倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板呈倒置状态放置，可以使培养皿表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养皿，对造成培养基污染。按图示步骤②稀释103倍后接种，取出后各平板的菌落数分别为 87、 85 和83，则细菌数大约是（87＋85＋83）÷3×103＝85000个/mL。