Question

【题目】已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断．人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖．鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖．将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体．请回答下列有关问题：
（1）生产单克隆抗体时，一般不直接利用效应B淋巴细胞，主要原因是 ．
（2）①过程中，常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是 ．
（3）②过程为培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入CO2的目的是 ．
（4）④表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠内培养．体内培养与体外培养相比，其优点是 ．
（5）为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需在③过程向培养液中加入 ， 理由是杂交瘤细胞可利用途径合成DNA，从而才能在该培养液中增殖．

Answer 1

【答案】
（1）B淋巴细胞不能无限增殖
（2）聚乙二醇
（3）细胞；维持培养液的pH
（4）腹腔；无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便
（5）氨基嘌呤；淋巴细胞中的S
【解析】解：（1）B淋巴细胞不能无限增殖，故生产单克隆抗体时，一般不直接利用一个B淋巴细胞．（2）①诱导动物细胞融合，常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是聚乙二醇．（3）②过程为细胞培养，培养液中还需通入气体，其中通入CO2的目的主要是维持培养液的pH．（4）④表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠腹腔内培养．体内培养与体外培养相比，其优点是无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便．（5）在培养液中加入氨基嘌呤，培养后收集增殖细胞．加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D全合成途径的骨髓细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，淋巴细胞一般不分裂增殖．因此培养液中加入该物质后，不能生长的细胞有骨髓瘤细胞、融合的淋巴细胞、融合的骨髓瘤细胞、淋巴细胞．人淋巴细胞和骨髓癌细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖． 所以答案是：（1）B淋巴细胞不能无限增殖；（2）聚乙二醇；（3）细胞；维持培养液的pH；（4）腹腔；无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便；（5）氨基嘌呤；淋巴细胞中的S
【考点精析】解答此题的关键在于理解单克隆抗体的制备的相关知识，掌握对免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴细胞；同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取；促使它们细胞融合；在特定的选择培养基上筛选出融合的杂种细胞；然后对它进行克隆化培养和抗体检测；最后将杂交瘤细胞在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的单克隆抗体．