Question

14．人血清白蛋白（HSA） 具有重要的医用价值，只能从血浆中制备．如图1是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径．

（1）为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取总RNA（或mRNA）合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因．如图2中箭头箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出标出另一条引物的位置及扩增方向．

（2）启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是B（填写字母，单选）．
A．人血细胞启动子   B．水稻胚乳细胞启动子  C．大肠杆菌启动子 D．农杆菌启动子
（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因成功转化．
（4）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性．与途径Ⅱ相比，选择途径I获取rHSA的优势是水稻是真核生物，具有膜系统，能对初始rHSA多肽进行高效加工．
（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与HSA的生物学功能一致．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）为获取HSA基因，可通过反转录法，首先需采集人的血液，提取合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因．由于DNA两条链是反向平行的，复制时也是方向相反，如图2中箭头箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，则另一条引物位于另一条链的相反一端．如图所示
．
（2）启动子通常具有物种及组织特异性，故若构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是水稻胚乳细胞启动子．
（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因成功转化．
（4）由于大肠杆菌为原核生物，无生物膜系统，而水稻为真核生物，具有生物膜系统，故在人体合成的初始HSA多肽，与途径Ⅱ相比，选择途径I获取rHSA的优势是 水稻是真核生物，具有膜系统，能对初始rHSA多肽进行高效加工．
（5）为证明rHSA具有医用价值，需对基因工程的产物进行鉴定，即确认rHSA与HSA的生物学功能一致．
故答案为：
（1）总RNA （或mRNA）

（2）B
（3）吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因成功转化
（4）水稻是真核生物，具有膜系统，能对初始rHSA多肽进行高效加工
（5）HSA

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤的相关细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．