Question

【题目】某研究小组按下图所示过程从土壤中筛选能高效降解尿素的细菌。请回答下列问题。

（1）步骤②是 。为了筛选目的菌，步骤③的培养基中加入的唯一氮源为 ，这种培养基属于 （填“鉴别”或“选择”）培养基。

（2）用平板划线法接种细菌是，不需用下列哪种器具？ （填字母）。在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，原因是 。

（3）将接种后的培养基和作为对照的 培养基同时放入恒温培养箱中培养，为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定，可在培养基中加入 指示剂，若指示剂变成 色，则说明该菌种能够分解尿素。

Answer 1

【答案】（1）样品稀释（或“系列稀释”、“梯度稀释”） 尿素 选择

（2）C 避免温度过高的接种环把菌种杀死

（3）一个为接种的（或“空白”） 酚红 红

【解析】

试题分析：（1）步骤②是梯度稀释样品。按功能不同，培养基可分成两类，鉴别培养基和选择培养基，培养基中不加其它氮素，只把尿素作为唯一氮源，其目的是想从众多微生物中选出能分解尿素的目的菌。

（2）平板划线法接种细菌时，需要准备装有菌种的试管，接种环用于取菌种，酒精灯用于灼烧接种环灭菌等，所以本题选C（用于平板划线法的接种钩）。在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，原因是避免温度过高的接种环把菌种杀死。

（3）将接种后的培养基和作为对照的空白培养基同时放入恒温培养箱中培养，为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定，可在培养基中加入酚红指示剂，因为体内目的菌的脲酶能将尿素分解成氨，氨可以作为细菌的氮源，同时会使培养基的pH升高，升高的PH会使酚红指示剂变为红色，因此可以通过检测培养基pH的变化来判断尿素是否被分解。

方法	平板划线法	稀释涂布平板法
注意事项	（1）接种环的灼烧：①第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染培养物；②每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端；③划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者。 （2）灼烧接种环之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高杀死菌种。 （3）划线时最后一区域不要与第一区域相连。 （4）划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。	（1）稀释操作时：每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm 处 （2）涂布平板时：①涂布器用体积分数为70%酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精；③酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体。
目的	在培养基上形成由单个菌种繁殖而来的子细胞群体——菌落
培养	平板冷凝后倒置培养，使培养基表面的水分更好地挥发，防止皿盖上水珠落入培养基造成污染