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    【题目】蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值。某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株，做了如下实验步骤(配制了下列培养基，在适宜条件下培养)：

    (1)为实现筛选目的，步骤Ⅰ所使用的培养基配方中，应去除______并加入高浓度的____________。该培养基从功能上看属于_______培养基。

    (2)灭菌是否彻底或是否被污染需要检测，检测方法是__________。

    (3)为实现目的菌的分离和计数，步骤Ⅱ所使用的培养基中还应加入____制成平板，采用的接种方法是_____________。

    (4)步骤Ⅲ的目的是__________________。

    【答案】葡萄糖蛋白质选择未接种的培养基在适宜条件下放置一段时间后，观察培养基上是否有菌落产生琼脂稀释涂布平板法快速增加目的菌的种群数量（扩大培养）

    【解析】

    微生物的营养成分主要有：碳源、氮源、水和无机盐等；大多数微生物是异养生物，在培养微生物时需要满足其生长的温度、pH和氧气等条件。该实验的目的是筛选产蛋白酶的高产菌株，即需要的菌株具有很强的分解蛋白质的能力，因此其利用的糖原和氮源都来自于蛋白质，不需要葡萄糖，则其培养基中应该除去葡萄糖、加入高浓度的蛋白质。

    （1）根据以上分析图已知，为了筛选出产蛋白酶的高产菌株，步骤Ⅰ所使用的培养基配方中应该除去葡萄糖并加入高浓度的蛋白质，这种加入了菌种需要的特殊物质的培养基属于选择培养基。

    （2）为了检测灭菌是否彻底或是否被污染，应该将未接种的培养基在适宜条件下放置一段时间后，观察培养基上是否有菌落产生。

    （3）接种常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中后者可以用于菌种的分离和计数，接种所用的应该是固体培养基，因此应该在步骤Ⅱ所使用的培养基中还应加入琼脂制成平板。

    （4）步骤Ⅲ挑取单菌落进行扩大培养，目的是快速增加目的菌的种群数量。

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