Question

【题目】应用现代生物技术可以大量获得针对甲型H1N5病毒的抗体，并可用于临床治疗，如图表示制备该抗体的设想，请据图回答下列问题

（1）在培育转入甲型H1N5病毒抗体基因的牛的过程中，①过程需要的工具酶是_________。②过程常用的方法是___________。

（2）转入甲型H1N5病毒抗体基因的牛可通过分泌乳汁来生产甲型H1N5病毒抗体，在基因表达中，甲型H1N5病毒抗体基因的首端必须含有_______，它是__________识别和结合的位点。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用______技术，培养出多头相同的转基因牛。

（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体，Ⅰ最可能是_______细胞，Ⅱ代表的细胞具有_______的特点。

（4）制备单克隆抗体也可以用动物细胞融合技术，与动物细胞融合过程不同，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用_________________对细胞进行处理。

Answer 1

【答案】限制酶、DNA 连接酶 显微注射法 启动子 RNA 聚合酶 胚胎分割 浆 既能在体外大量增殖，又能产生专一抗体 纤维素酶、果胶酶

【解析】

分析题图：甲型H1N5病毒抗体基因是目的基因，图中①表示基因表达载体的构建过程；②是将重组质粒导入受体细胞；③胚胎移植等过程。prG是一种调控因子，也可以作为基因工程的目的基因，因为只有浆细胞能产生抗体，所以图中|是浆细胞，Ⅱ是导入prG能无限增殖的细胞。

（1）由以上分析可知：①是基因工程中基因表达载体的构建过程，需要先用限制酶切割目的基因和运载体，后用DNA连接酶连接成重组DNA。将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。

（2）基因表达载体包括启动子、目的基因、标记基因和终止子等，所以在甲型H1N5病毒抗体基因的首端必须含有启动子。它是RNA聚合酶识别和结合的位点，③是胚胎移植过程，移植前需将受精卵培养到桑椹胚或囊胚时期再植入母体。因为来自同一胚胎的后代具有相同的基因型，所以要培养出多头相同的转基因奶牛，可以采用胚胎分割技术。

（3）只有浆细胞能分泌抗体，因此I最可能是浆细胞（效应B细胞）细胞。导入prG后浆细胞才具备无限增殖的能力，因此筛选出的Ⅱ细胞既能无限增殖又能产生特定抗体。

（4）植物体细胞杂交在细胞融合之前要用酶解法去细胞壁，即用纤维素酶和果胶酶对细胞进行处理，以除去细胞壁。