[题目]我们日常吃的大米中铁含量极低.科研人员通过基因工程等技术.培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻.改良了稻米的营养品质.下图为培育转基因水稻过程示意图.请分析回答:[1]铁结合蛋白基因来自菜豆.且基因的脱氧核苷酸序列已知.可以用法获得此目的基因.[2]构建重组Ti质粒时.通常要用分别切割 .已知限制酶a的识别序列� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术。培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质，下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答：

【1】铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用________________法获得此目的基因。

【2】构建重组Ti质粒时，通常要用________分别切割_____________。已知限制酶a的识别序列和切点是－G1GATCC－，限制酶b的识别序列和切点是－1GATC－。请画出Ti质粒被限制酶a切割后所形成的两个DNA片段末端碱基序列________________。（请写在答题卡上的方框内）

【3】将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得________________；培养基3与培养基2的区别是________________。检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻________________。

【4】为研究外源基因的遗传方式，将To代植株上收获的种子种植成T1代株系，检测各单株的潮霉素抗性，在检测的多数T1代株系内，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3∶1，此结果说明外源基因的遗传符合________________。有少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是________________。

【答案】

【1】化学合成（从基因文库中获取目的基因）

【2】（同种）限制性核酸内切酶含目的基因的DNA片段和质粒

【3】含有重组质粒（有潮霉素抗性）的愈伤组织生长素和细胞分裂素的比例（成熟）种子中铁含量

【4】基因分离定律潮霉素抗性基因没有表达（或潮霉素抗性基因丢失）

【解析】

【1】铁结合蛋白基因的脱氧核苷酸序列已知，因次可以用化学合成法获得此目的基因，也可从基因文库中获取目的基因。

【2】构建重组质粒时，通常要用同种限制性核酸内切酶分别切割含目的基因的DNA片段和质粒。因为限制酶a的识别位点和切点是-G↓GATCC-，所以Ti质粒被限制酶a切割后所形成的两个DNA片段末端碱基序列为。

【3】将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得含有重组质粒（有潮霉素抗性）的愈伤组织。在培养基2中愈伤组织分裂增殖，此时细胞分裂素与生长素浓度比值大致等于1，愈伤组织再分化阶段，培养基中细胞分裂素与生长素浓度比值的不同，可分化成不同的组织或器官，比值大，形成芽，比值小，形成根。所以培养基2和3的区别是生长素和细胞分裂素的浓度比例。若要检测培育转基因水稻的目的是否达到，则需检测该基因是否表达，即检测种子中铁的含量。

【4】在检测的多数T1代株系中，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3:1，这说明外源基因的遗传符合基因分离定律。有少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但体内能检测到铁蛋白结合基因，其原因可能是潮霉素抗性基因没有表达或潮霉素抗性基因丢失。

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