Question

【题目】某小组从发酵的豇豆中提取发酵液，进行菌种培养并分离，得到了三个品系的乳酸菌菌株，编号后分别接种在四种不同的培养基上，培养并统计培养基上的菌落数，结果如下表所示。请回答下列问题：

	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ
1	289	251	103	95
2	275	201	95	60
3	242	169	78	32

（1）在分离菌株的四种培养基中都有水、无机盐、________等营养物质，其中的无机盐包括适量的NaCl溶液，NaCl溶液的作用是________（答出两点）。

（2）无菌技术是获得纯化菌株的关键，该技术能防止培养物被外来微生物污染，也能________。分离纯化菌株时要进行梯度稀释，目的是________。

（3）据表分析，在Ⅰ～Ⅳ号培养基中，用________号培养基培养菌株的效果最好，理由是________。

（4）临时保存上述三种菌株，应将菌种先接种到试管的________上进行培养，然后置于4℃冰箱中保藏。

Answer 1

【答案】碳源、氮源 为乳酸菌的生长繁殖提供无机营养；维持培养基的渗透压 避免操作者自身被微生物感染 将浓度较高的乳酸菌分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个的菌落 Ⅰ 在Ⅰ号培养基上，三种菌株的菌落数都最多 固体斜面培养基

【解析】

微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求；无菌技术除了防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还可以避免操作者自身被微生物污染，为防止杂菌污染需要对实验室的空间、操作者的衣着和双手进行清洁和消毒，将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌，实验操作应该在酒精灯火焰附近进行，操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品接触。分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个的菌落。

（1）在分离菌株的四种培养基中都有水、无机盐、碳源、氮源等营养物质，其中的无机盐包括适量的NaCl溶液，NaCl溶液的作用是为乳酸菌的生长繁殖提供无机营养、维持渗透压。

（2）无菌技术是获得纯化菌株的关键，该技术能防止培养物被外来微生物污染，也能避免操作者自身被微生物感染。小组要从豇豆发酵液中分离得到乳酸菌菌株，分离纯化菌株时要进行梯度稀释，目的是将浓度较高的乳酸菌分散成单个细胞，从而在培养基表面容易形成单个的菌落。

（3）据表分析，Ⅰ～Ⅳ号培养基中，在Ⅰ号培养基上，三种菌株的菌落数都最多，因此用Ⅰ号培养基培养菌株的效果最好。

（4）临时保存上述三种菌株，应将菌种先接种到试管的固体斜面培养基上进行培养，然后置于4℃冰箱中保藏。