[题目]接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法.乙肝疫苗的研制先后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段.血源性乙肝疫苗是取用乙肝病毒感染者的血液.用高速离心法提纯血液中的乙肝病毒.之后再将其灭活.制成乙肝疫苗.具有一定的感染风险.如图所示为乙肝基因工程疫苗的生产和使用过程.根据所学知识.请回答下列问题:(1)基因工程中所用的目的基因可以人� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法，乙肝疫苗的研制先后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段。血源性乙肝疫苗是取用乙肝病毒感染者的血液，用高速离心法提纯血液中的乙肝病毒，之后再将其灭活，制成乙肝疫苗，具有一定的感染风险。如图所示为乙肝基因工程疫苗的生产和使用过程。根据所学知识，请回答下列问题：

（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括___________和____________。

（2）过程①最好选用的限制酶组合是_____，请说出你的选择理由：_______

（3）重组质粒中，启动子与复制原点的化学本质______________ （填“相同”或“不同”），启动子的作用是__________________________________________________。

（4）图中过程②常需要用____处理，使大肠杆菌细胞转化为感受态细胞，由图中过程③可知，该目的基因的具体功能是_____________________。

（5）用基因工程疫苗接种比血源性疫苗更安全，试从疫苗的结构特点解释其原因。__________________________________________________

【答案】基因组文库 cDNA文库 BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ 可以保持目的基因的完整性，同时防止目的基因和质粒发生自身环化相同是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录形成mRNA Ca2＋指导合成乙肝病毒外壳蛋白研制血源性疫苗需灭活破坏乙肝病毒的核酸结构，灭活不成功则会导致接种者患病，而基因工程疫苗不含核酸，其中起作用的是蛋白质，不会引发病毒增殖和感染

【解析】

基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）基因文库包括基因组文库和部分基因文库（cDNA文库），基因组文库包含了一个种生物的全部基因，而部分基因文库只包含了一种生物的一部分基因。
（2）根据图解可知，含有目的基因的外源DNA和运载体上都有限制酶BamHI、EcoRl和EcoRV的识别序列和切割位点，用EcoRV切割会破坏目的基因，因此图中过程①有两种限制酶选择方案，它们分别是只用BamHI或同时用EcoRI和BamHI，其中同时用EcoRI和BamHI可以保持目的基因的完整性，同时防止目的基因和质粒发生自身环化。
（3）启动子与复制原点的化学本质相同，都是DNA片段。启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录形成mRNA。
（4）将目的基因导入大肠杆菌细胞，需要先用Ca2+处理，使大肠杆菌细胞转化为感受态细胞，从过程③可知，该目的基因的具体功能是控制病毒蛋白质外壳的合成。
（5）用基因工程疫苗接种比血源性疫苗更安全，原因是该疫苗不具有遗传物质（DNA、病毒的DNA），不会出现病毒的增殖和感染。

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（1）与步骤②相比，步骤③的培养基成分还含有__________、___________。两培养基均以木糖作为唯一碳源的目的是___________。

（2）步骤③中，应在_____________附近倒平板，不采用涂布平板接种的原因是___________________________________________________________。平板在适宜条件下培养一段时间后，筛选有透明圈的菌落作为候选菌，这里的准确筛选的主要依据是_______________________________________。

（3）按功能分，步骤③中培养基属于______________________培养基。

（4）科研人员从候选菌中初步筛选出产乳酸能力较强的四种菌株，再通过连续转接和液体发酵进行遗传稳定性检测，得到下表所示结果（单位：g/L），最终确定卫10为最优菌株，依据是___________。

传代次数	菌株
传代次数	卫10	卫32	卫56	卫69
2	70.78	71.23	70.52	69.24
5	70.23	69.52	67.46	65.56
8	69.58	62.16	60.52	61.53
11	70.75	55.69	52.42	55.72
14	69.42	42.28	40.22	44.38