Question

【题目】体细胞核移植已经成功克隆了多种哺乳动物，但成功率很低。研究表明一定浓度的TSA（曲古抑菌素A）能提高克隆胚胎的囊胚发育率及克隆后代的存活率，为了优化TSA的处理方案，科研人员研究了TSA浓度及处理时间对猪核移植胚胎体外发育的影响，其基本操作过程如下，过程①中添加TSA。请据图回答问题：

（1）收集的卵母细胞应培养到______期进行去核，去核的同时一并将______ 去掉。

（2）过程①除加入激素、氨基酸、维生素等营养物质外，还需加入__等天然成分，培养的气体中应控制5%左右的CO2,其目的是______。

（3）在进行过程②操作前应对代孕母猪进行______ 处理，使生殖器官处于相同的生理状态；通过手术进行过程②操作，应从______（部位）将早期胚胎注入子宫，可提高胚胎的着床率。

（4）下表1表示实验一（不同浓度TSA处理重组细胞12h）的实验结果，下表2表示在实验一基础之上做的实验二（某浓度TSA处理重组细胞12h和24h）的实验结果。实验二所用TSA的浓度是___，表2数据表明______ 有助于提高猪核移植胚胎的发育潜能。

Answer 1

【答案】减数第二次分裂中 第一极体 动物血清 维持培养液的pH 同期发情处理 子宫角 40nmol·L-1 控制好TSA处理的时间（或将TSA处理时间控制12小时左右）

【解析】

上图为细胞核移植过程，将去核的卵母细胞与成纤维细胞融合形成重组细胞，经过①动物细胞培养形成早期胚胎A，将早期胚胎经过胚胎移植到代孕母猪体内，经过代孕母猪孕育后并分娩。

（1）卵母细胞在体外培养到减数第二次分裂中期时进行去核，去核的同时一并将第一极体去掉。

（2）过程①为动物细胞培养的过程，培养基中除加入激素、氨基酸、维生素等营养物质外，还需加入动物血清等天然成分，动物细胞培养过程提供二氧化碳的作用是维持培养液的pH。

（3）将早期胚胎移入代孕母猪的子宫的过程为胚胎移植，为使代孕母猪与供体猪的生殖器官的生理变化相同，移植前需要对代孕母猪做同期发情处理。通过手术进行胚胎移植时，应从子宫角将早期胚胎注入子宫，可提高胚胎的着床率。

（4）本实验结果表观，40μmol·L－1的TSA对猪囊胚的形成较为有利，其判断依据是囊胚数占重组细胞数的比例较高。实验二的自变量是TSA处理时间，故实验所用TSA的浓度应最适，所以实验二所用TSA的浓度是40μmol·L－1，表2数据表明TSA处理时间为12小时比处理24小时有利于囊胚数形成，所以表2数据表明控制好TSA处理的时间（或将TSA处理时间控制12小时左右）有助于提高猪核移植胚胎的发育潜能。