Question

【题目】“生物导弹”可用于杀死人类某些癌细胞，制备“生物导弹”是单克隆抗体的重要应用之一，其过程如下图所示。请据图回答：

（1）在①-⑤批量生产A蛋白抗原的过程中，要快速获得大量的A基因可采用_____技术。 在该技术中，解旋的方法是_______。

（2）在⑥-⑨批量生产“生物导弹”的过程中，⑦过程所用的“脾脏中的细胞”为_______，⑦过程区别于植物体细胞杂交技术所特有的诱导因素是_______，要得到所需的杂交瘤细胞一般要经过_____个阶段筛选。

（3）培养杂交瘤细胞的培养液通常需要加入血清的作用是_______。

（4）步骤⑧获得的单克隆抗体最终可以从_____（①小鼠腹水、②培养液）提取，抗体的靶向作用是利用了其_____的特点。

（5）单克隆抗体通过上图所示的基因工程来制备，此技术的核心步骤是_______。

Answer 1

【答案】PCR 适当的高温处理 B淋巴细胞（或浆细胞） 灭活的病毒处理 2 血清中还包含了一些动物的激素和酶等未知成分，可以促进细胞的生长发育 ①、② 特异性 基因表达载体的构建

【解析】

1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养或注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
2、图中①②③为基因工程，④为早期胚胎培养，⑤⑥提取A蛋白，注入到小鼠体内获取产生抗体的B淋巴细胞，⑦是细胞融合，⑧是筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，制备单克隆抗体，进而制备生物导弹。

（1）为了快速的获得A基因，可利用PCR技术在体外对DNA进行复制，PCR是利用高温（90℃-95℃）解开双链DNA。故在该技术中，解旋的方法是适当的高温处理。

（2）过程⑦表示将受抗原刺激的B淋巴细胞（或浆细胞）和骨髓瘤细胞融合的过程，故⑦过程所用的“脾脏中的细胞”为B淋巴细胞（或浆细胞）；⑦过程区别于植物体细胞杂交技术所特有的诱导因素是用灭活的病毒处理；经过诱导融合后可得到3种融合的细胞和未融合的细胞，经过选择培养基的筛选可得到杂交瘤细胞，再经过单一抗体阳性检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，即该过程需要经过两个阶段的筛选。

（3）由于血清中包含了一些动物的激素和酶等未知成分，可以促进细胞的生长发育，故培养杂交瘤细胞的培养液通常还需要加入血清。

（4）杂交瘤细胞进行克隆化培养时，可用培养基培养或注入小鼠腹腔中培养，最后可从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。故步骤⑧获得的单克隆抗体最终可以从①、②中提取。抗体与抗原可发生特异性结合，故抗体的靶向作用是利用了其特异性的特点。

（5）单克隆抗体还可通过基因工程来制备，此技术的核心步骤是基因表达载体的构建，所用的工具酶是限制酶和DNA连接酶。