Question

【题目】如图为农杆菌转化法示意图。请回答以下问题：

(1)图中①过程用到的工具酶的特点是________________。

(2)图中②过程用到的工具酶是____________，该过程是基因工程最核心的步骤，即____________。

(3)图中③过程，需使用________溶液处理农杆菌使其成为感受态。

(4)图中④过程的原理是____________。

(5)检测基因工程是否成功。首先，应检测________________________________，这是目的基因能否在真核细胞内稳定遗传的关键；其次，利用____________法检测目的基因是否转录出相应的mRNA；最后，利用____________法检测目的基因是否翻译成蛋白质。

Answer 1

【答案】能识别特定的脱氧核苷酸序列并且在特定位点切开DNA分子 DNA连接酶 基因表达载体的构建 氯化钙 植物细胞的全能性 转基因生物的染色体上是否插入目的基因 分子杂交 抗原—抗体杂交

【解析】

据图分析，①过程表示切割质粒，产生粘性末端；②过程表示构建基因表达载体；③过程表示将目的基因导入受体细胞（农杆菌）；④过程表示植物组织培养。

（1）①过程表示用限制酶切割质粒产生粘性末端的过程，该过程使用的限制酶能识别特定的脱氧核苷酸序列并且在特定位点切开DNA分子。

（2）②过程表示构建基因表达载体的过程，是基因工程的核心步骤，该过程需要DNA连接酶将外源基因（目的基因）与质粒连接起来。

（3）图中③过程，将目的基因导入微生物（农杆菌）细胞常用感受态转化法，即用氯化钙溶液处理该细菌，处理的目的是使该细菌处于感受态。

（4）④过程表示植物组织培养，其原理是植物细胞的全能性。

（5）目的基因分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。