Question

在重组DNA的模拟操作中，下图甲、乙分别模拟两种DNA片段的碱基序列，已知E·coli限制酶专一识别GAATTC序列，并选G—A之间作为切点进行切割。
……CTATCCATGAATTCGGCATAC……
……GATAGGTACTTAAGCCGTATG……
甲
……TCCTAGAATTCTATGAATTCCATAC……
……AGGATCTTAAGATACTTAAGGTATG……
乙

（1）图甲模拟?碱基序列，图乙模拟碱基序列?。

（2）在上图中用箭头标出E·coli限制酶的作用部位。

（3）写出甲、乙经E·coli限制酶切割后形成的黏性末端。

（4）写出经DNA连接酶连接后形成的重组DNA分子的碱基序列。

Answer 1

（1）质粒载体 目的基因

（2）略

（3）……CTATCCATG AATTCGGCATAC……
……GATAGGTACTTAA GCCGTATG……
甲
AATTCTATG
GATACTTAA
乙

（4）…CTATCCATGAATTCTATGAATTCGGCATAC…
…GATAGGTACTTAAGATACTTAAGCCGTATG…

（1）根据碱基的排列顺序可知图甲模拟运载体的碱基序列，图乙模拟目的基因的碱基序列；（2）限制酶具有专一性，能识别特定的核苷酸序列；（3）甲、乙经?E·coli?限制酶切出的黏性末端能够碱基互补配对；?（4）目?的基因通过碱基互补配对和DNA连接酶的作用可以形成的重组DNA分子的碱基序列。