Question

【题目】乳酸菌是泡菜制作中起主要作用的菌群，某科研小组从泡菜液中分离、筛选纯种乳酸菌，对其功能进行相关研究，为改进传统泡菜生产工艺提供技术参考。

（1）乳酸菌菌种的分离与纯化：

取泡菜发酵汁进行 操作，得到、、、、、倍的稀释液。选择合适的稀释度样液加入10mL乳酸菌分离培养基（MRS培养基），凝固后再注入5mL水琼脂培养基，造成 （需氧/厌氧）环境，37℃培养2～3天，根据 的形状、大小、隆起程度等特征，进行反复分离、纯化至纯菌种。整个操作过程需在 条件下进行。

（2）产强酸菌株的筛选：

利用产酸菌在含的培养基上产生溶解圈的原理，将上述菌种接种到含的MRS培养基上，经过培养，挑选 的菌落，进一步纯化。

（3）产强酸菌株的功能研究，结果如下图：

人工接种乳酸菌有利于 （促进/抑制）亚硝酸盐的生成。泡菜制作过程中，影响亚硝酸盐含量的因素还有时间、 和 等。

Answer 1

【答案】（1）梯度稀释（或系列梯度） 厌氧 菌落 无菌

（2）溶解圈较大

（3）抑制 温度 食盐用量

【解析】试题分析：（1）要得到、、、、、倍的稀释液的泡菜汁，需要进行一定浓度的梯度稀释处理。由于乳酸菌属于厌氧菌，所以培养过程环境需要厌氧环境。肉眼可观察的是乳酸菌的菌落特征。要分离纯化某种细菌，都需要在无其他杂菌感染的情况下进行。

（2）利用产酸菌在含的培养基上产生溶解圈的原理，所以溶解圈越大，该处菌落含有的产酸菌越多，也就越容易挑选、分离和纯化。

（3）由于亚硝酸盐的生成需要在有氧环境中进行，所以人工接种乳酸菌（厌氧环境）有利于抑制亚硝酸盐的生成。泡菜制作过程中，影响亚硝酸盐含量的因素还有时间、温度和食用盐量等。