Question

【题目】胰岛素是治疗糖尿病的重要药物．现利用基因工程技术让大肠杆菌生产人胰岛素．图为大肠杆菌质粒，tetR和ampR分别是四环素抗性基因和青霉素抗性基因．请据图作答．

（1）获取目的基因时，应从人的（基因组/cDNA）文库中获取，这样做的原因是 ． 假设人胰岛素基因中不含EcoRI、BamHI和Hind III限制酶的酶切位点，在获取目的基因后，应在目的基因两端添加的识别序列再进行酶切，就能保证把目的基因定向插入到质粒中，而且还能防止目的基因 ．
（2）在重组成功后，将重组质粒导入大肠杆菌常用法；选用大肠杆菌作受体细胞的原因是 ．
（3）天然人胰岛素不耐储存，可使用蛋白质工程对蛋白质进行改造．蛋白质工程的基本途径为：→设计预期的蛋白质结构→→找到相应的脱氧核苷酸序列．

Answer 1

【答案】
（1）cDNA；cDNA（中无内含子序列，）能够在大肠杆菌中表达出正确的蛋白质；BamH I 和EcoR I限制酶；自身环化
（2）感受态细胞（Ca2+处理细胞）；繁殖快、是单细胞、遗传物质相对较少等
（3）从预期的蛋白质功能出发；推测应有的氨基酸序列
【解析】解：（1）分析题意可知，受体细胞为大肠杆菌，由于大肠杆菌属于原核生物，原核生物基因中没有内含子，因此获取目的基因时，应从人的cDNA文库中获取，这样做能够在大肠杆菌中表达出正确的蛋白质．假设人胰岛素基因中不含EcoRI、BamHI和Hind III限制酶的酶切位点，在获取目的基因后，应在目的基因两端添加BamH I 和EcoR I限制酶的识别序列再进行酶切，就能保证把目的基因定向插入到质粒中，而且还能防止目的基因自身环化．（2）在重组成功后，将重组质粒导入大肠杆菌常用感受态细胞（Ca2+处理细胞）法；选用大肠杆菌作受体细胞的原因是繁殖快、是单细胞、遗传物质相对较少等．（3）天然人胰岛素不耐储存，可使用蛋白质工程对蛋白质进行改造．蛋白质工程的基本途径为：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相应的脱氧核苷酸序列．
所以答案是：（1）cDNA cDNA（中无内含子序列，）能够在大肠杆菌中表达出正确的蛋白质 BamH I 和EcoR I限制酶 自身环化（2）感受态细胞（Ca2+处理细胞） 繁殖快、是单细胞、遗传物质相对较少等（3）从预期的蛋白质功能出发 推测应有的氨基酸序列
【考点精析】通过灵活运用基因工程的原理及技术，掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术即可以解答此题．