葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题.引进果酒.果醋生产线进行葡萄的深加工.获得了较好效益.其生产流程如图所示.据图回答:(1)在筛选菌种A时.需要在接种前用高压蒸汽灭菌法对葡萄果汁进行灭菌．对于需要长期保存的菌种.可以采用甘油管藏的方法．(2)在纯化菌种A时接种了5个平板.每个平板均接种了0.1mL样品并培养．其中乙平板的菌落� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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15．葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题，引进果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工，获得了较好效益，其生产流程如图所示，据图回答：
（1）在筛选菌种A时，需要在接种前用高压蒸汽灭菌法对葡萄果汁进行灭菌．对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法．
（2）在纯化菌种A时接种了5个平板，每个平板均接种了0.1mL样品并培养．其中乙平板的菌落分布如图，纯化菌种A的接种方法是稀释涂布平板法，推测出现平板乙可能的操作失误是涂布不均匀．其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落数分别是180、220、480、200，则样品中菌种A的数量为2000个/mL，用该方法统计的结果，一般低于（低于、高于）实际值．
（3）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和细胞分裂素，这些植物激素一般需要事先单独配置成母液保存备用．

分析 1、微生物的实验室培养常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌及灼烧灭菌．
2、微生物接种常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，后者常用来统计活菌数，但统计的数目往往比实际值低，因为当两个或多个细菌连在一起时，往往统计的是一个菌落．
3、对于频繁使用的菌种常采用斜面保藏法，对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏的方法．
4、分析题图：图示表示两种微生物的筛选、分离、纯化的过程及果酒和果醋的制作过程，其中候选菌A是酵母菌，候选菌B是醋酸（杆）菌．

解答解：（1）葡萄果汁作为筛选菌种A时的培养基需要在接种前用高压蒸汽灭菌进行灭菌．需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏法．
（2）分析图乙中培养基培养结果，可以推知采用的纯化方法是稀释涂布平板法．样品中菌种A的数量为（180+220+200）÷3÷0.1=2000 个/mL，由于稀释涂布平板法的个别菌落可能来自于两个和多个细胞，所以用该方法统计的结果，一般低于实际值．
（3）植物组织培养常需要添加生长素和细胞分裂素，并且需要单独配置成母液备用．
故答案为：
（1）高压蒸汽灭菌甘油管藏
（2）稀释涂布平板法 2000 低于
（3）母液

点评本题主要考查微生物的筛选与分离、植物组织培养的应用，意在强化学生对教材相关知识的识记、理解与掌握．

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