Question

【题目】酸雨主要是大气中所含的SO2造成的，利用微生物脱硫，具有工艺条件温和，成本低，还能脱出部分有机硫等优点。研究人员通过采集菌种，分离出目的菌后进行了如下操作，请回答下列相关问题：

(1)为保证培养基上能均匀地生长出一层脱硫细菌，将菌液接种到固体培养基上时应采用_______（填“涂布平板”或“平板划线”）法；操作过程中，与用于计数时的平板接种不同的是：本实验要保证滴加到培养基上的菌液____，以缩短培养时间。要对脱硫细菌进行长期保存，可采用____的方法在-20℃的冷冻箱中保存。

(2)本实验过程中所使用的 ___技术，除了用来防止培养的脱硫细菌被其他外来微生物污染外，还能有效避免____被微生物（脱硫细菌）感染。

(3)研究小组将四种含有等量抗菌药物的纸片贴在已接种脱硫细菌的琼脂平板上做药敏试验，在适宜的温度条件下培养16h，结果如下图所示：

根据上图的试验结果可知，对于脱硫细菌，抗生素I的最低抑制浓度____(填“大于”“小于”或“等于”）抗生素Ⅲ。在相关试验操作均严谨规范的情况下，在含有抗生素Ⅳ的纸片周围出现了较大的抑菌圈，抑菌圈中存在有若干个脱硫细菌的菌落。试对上述现象的成因作出___

Answer 1

【答案】涂布平板 含足够多的脱疏细菌（或浓度足够高） 甘油管藏 无菌 操作者自身 大于 抗生素Ⅳ对于野生型脱硫细菌具有较强的抑制作用，但脱硫细菌中已经出现能抵抗抗生素Ⅳ的抗性突变株

【解析】

纯化细菌：
（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
（2）微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

(1) 平板划线法的划线开始的部分，微生物往往连在一起生长，故为保证培养基上能均匀地生长出一层脱硫细菌，需将菌液采用涂布平板法接种到固体培养基上；操作过程中，与用于计数时的平板接种不同的是：本实验要保证滴加到培养基上的菌液含足够多的脱疏细菌，以缩短培养时间。要对脱硫细菌进行长期保存，可采用甘油管藏的方法在-20℃的冷冻箱中保存。

(2)微生物培养过程中使用的无菌技术，除了用来防止培养的脱硫细菌被其他外来微生物污染外，还能有效避免操作者自身被微生物（脱硫细菌）感染。

(3) 由于抗生素Ⅲ所在部位出现的白色透明圈大于抗生素I所在部位的透明圈，说明抗生素Ⅲ的抑菌效果大于抗生素I，故抗生素I的最低抑制浓度应大于抗生素Ⅲ。透明圈大，说明抗生素Ⅳ对于野生型脱硫细菌具有较强的抑制作用，抑菌圈中存在有若干个脱硫细菌的菌落，说明脱硫细菌中已经出现能抵抗抗生素Ⅳ的抗性突变株。