Question

14．小鼠是继果蝇之后的又一种模式动物，图1表示生产长效胰岛素转基因小鼠培育过程示意图，图2表示图1中③表达载体构建过程图示．请回答下列问题：

（1）图1中的过程①注射A物质的目的是使供体母鼠超数排卵，若进行体外受精，则需将未成熟的卵子培养至减数第二次分裂中期（或MⅡ中期）才具备受精能力．
（2）在图2中，当目的基因的DNA用HindⅢ、BamhⅠ完全酶切后反应管中有4种DNA片段，经过程⑧形成的重组质粒上将有HindⅢ（或1种）限制酶的切点．
（3）为确保目的基因在小鼠细胞中进行表达，图2的⑧过程在构建基因的表达载体时，需将目的基因插在启动子、终止子两种片段之间，将表达载体送入细胞时，图1中的过程④常用的方法是显微注射．
（4）为检测目的基因是否成功表达，通常采用的方法是抗原-抗体杂交．

Answer 1

分析 分析图1：图示为某转基因小鼠培育过程示意图，其中①表示注射促性腺激素，使其超数排卵；②表示同期发情处理；③表示基因表达载体的构建；④表示将目的基因导入受体细胞；⑤表示早期胚胎培养过程；⑥表示筛选；⑦表示胚胎移植过程．
分析图2：图2表示图1中③表达载体构建过程图示．

解答 解：（1）过程①注射的激素是促性腺激素，目的是促进良种母畜超数排卵；体外受精时，要将未成熟的卵子培养至减数第二次分裂中期（或MⅡ中期）才具备受精能力．
（2）在图2中，目的基因的DNA含有1个HindⅢ切割位点，2个BamhⅠ切割位点，因此该目的基因DNA用HindⅢ、BamhⅠ完全酶切后反应管中有4种DNA片段；目的基因是用限制酶HindⅢ、BamhⅠ切割获得的，而质粒是用限制酶HindⅢ、BclⅠ切割的，由于BamhⅠ和BclⅠ切割形成的黏性末端相同，因此目的基因和质粒可经DNA连接酶连接形成重组质粒，但重组质粒上有HindⅢ（或1种）的切点，没有BamhⅠ和BclⅠ切点．
（3）为确保目的基因在小鼠细胞中进行表达，图2的⑧过程在构建基因的表达载体时，需将目的基因插在启动子、终止子两种片段之间；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．
（4）为检测目的基因是否成功表达，通常采用抗原-抗体杂交法．
故答案为：
（1）超数排卵    减数第二次分裂中期（或MⅡ中期）
（2）4     HindⅢ（或1种）
（3）启动子、终止子    显微注射
（4）抗原-抗体杂交

点评 本题结合某转基因小鼠培育过程示意图，考查基因工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及具体步骤，掌握各步骤中注意的细节问题；识记胚胎移植的基本程序，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题．