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    10．为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种．

    （1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR技术从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，所含三种限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切点如下图所示．则用ClaⅠ和DNA连接 酶处理两个基因后，可得到A端与D端（填图中字母）相连的融合基因．
    （2）将上述融合基因插入右上图所示Ti质粒的T-DNA中，构建基因表达载体（或“重组质粒”）并导入农杆菌中．将获得的农杆菌接种在含四环素的固体培养基上培养得到含融合基因的单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的侵染液．
    （3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞．
    （4）进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过植物组织培养技术，可培育成转基因油菜植株．用抗原-抗体杂交法在分子水平上可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达．

    分析 1、基因文库包括cDNA文库、基因组文库等．某个群体包含一种生物所有的基因的文库叫基因组文库，而用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段属于cDNA文库．
    2、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．同种限制酶切割能够产生相同的黏性末端，便于质粒和目的基因连接．

    解答 解：（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR法从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因．在上述引物设计时，分别在引物中加入如图甲所示酶的识别序列，这样可以用ClaⅠ限制酶和DNA连接酶处理两个基因后，得到A、D端相连的融合基因．
    （2）将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的T-DNA中，构建表达载体即重组质粒并导入农杆菌中．将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌落．
    （3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞．
    （4）将转基因细胞培养成转基因植株需要采用植物组织培养技术；检测目的基因是否成功表达，应该采用抗原-抗体杂交法．
    故答案为：
    （1）PCR    ClaⅠDNA连接    A   D
    （2）基因表达载体（或“重组质粒”）    四环素
    （3）利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞
    （4）植物组织培养   抗原-抗体杂交

    点评 本题以增加油菜种子的含油量为材料背景，考查基因工程的相关知识，要求考生能够掌握目的基因获取的方法，能够结合图解中限制酶切点选择合成的工具酶获得融合基因，同时掌握目的基因导入受体细胞以及目的基因检测与鉴定的方法等．

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    3．下列关于染色体结构变异的叙述，错误的一项是（　　）
    A．猫叫综合征是人的第5号染色体部分缺失引起的
    B．染色体结构变异使染色体上基因的数目和排列顺序发生改变
    C．大多数染色体结构变异对生物体是有利的
    D．用显微镜可以直接观察到染色体结构改变

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    1．下列关于限制酶和DNA连接酶的理解不正确的是（　　）
    A．其化学本质都是蛋白质
    B．都是从原核生物中分离纯化出来的
    C．DNA聚合酶和DNA连接酶催化合成的化学键是相同的
    D．都能被反复使用

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    18．下列关于蛋白质的叙述，正确的是（　　）
    A．蛋白质是生物体主要的能源物质
    B．血红蛋白中不同肽链之间通过肽键连接
    C．不同氨基酸之间的差异是由R基引起
    D．蛋白质区别于脂质的特有元素是氮

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    5．人类中非秃顶和秃顶受常染色体上的等位基因 （B、b）控制，其中男性只有基因型为BB时才表现为非秃顶，而女性只有基因型为bb时才表现为秃顶．控制褐色眼（D）和蓝色眼（d）的基因也位于常染色体上，其表现型不受性别影响．这两对等位基因独立遗传．回答问题：
    （1）非秃顶男性与秃顶女性结婚，子代的表现型为女儿全部为非秃顶，儿子全部为秃顶．
    （2）非秃顶男性与杂合子非秃顶女性结婚，子代的表现型为女儿全部为非秃顶，儿子中有秃顶和非秃顶．
    （3）一位其父亲为秃顶蓝色眼而本人为秃顶褐色眼的男性与一位非秃顶蓝色眼的女性结婚．这位男性的基因型为BbDd或bbDd，这位女性的基因型为Bbdd或BBdd．若两人生育一个女儿，其所有可能的表现型为非秃顶褐色眼、非秃顶蓝色眼、秃顶褐色眼和秃顶蓝色眼．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    15．苹果醋具有营养丰富，增强机体免疫力，护肤养肝等多种功效，以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图如图1，请分析回答：

    （1）过程甲中使用的微生物是酵母菌，样液中是否产生酒精，可以用（酸性）重铬酸钾溶液来检验．
    （2）利用苹果酒制作苹果醋的化学反应方程式是C2H5OH+O2$\stackrel{酶}{→}$CH3COOH+H2O+能量．
    （3）某同学尝试自己利用图2装置制果醋，制作过程中进气口应充入空气，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是防止空气中微生物的污染．
    （4）图3是腐乳制作的实验流程示意图．从微生物培养的角度分析，豆腐就是毛霉等微生物的培养基，按照其物理状态称为固体培养基．现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染，保证产品的质量．腐乳制作过程中，加盐的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬和抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    2．超氧化物歧化酶（SOD）是一种源于生命体的活性物质．如图为人工培育含SOD植物新品种的过程，相关叙述正确的是（　　）
    植物细胞（二倍体）$→_{①}^{SOD基因}$新细胞$\stackrel{②}{→}$愈伤组织$\stackrel{③}{→}$胚状体→新品种．
    A．①过程常用Ca2+处理法导入SOD基因
    B．②、③过程所用的激素种类和比例都相同
    C．SOD催化反应的机制是为反应提供活化能
    D．图示育种过程体现了植物细胞的全能性

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    19．下面有关牛的胚胎移植过程的描述，不正确的是（　　）
    A．受体牛应选择有健康的体质和正常繁育能力的个体
    B．冲卵是指从供体母牛子宫中冲洗出受精卵
    C．通过胚胎检查，发育到囊胚或桑椹胚才可移植
    D．胚胎移植前不需要先进行免疫排异反应的实验

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    科目：高中生物 来源：2016届江苏南师大第二附属高级中学高三初期考试生物试卷（解析版） 题型：综合题

    下图中a、b、c、d为细胞器，3H亮氨酸参与图示过程可合成物质3HX。请据图回答下列问题：

    （1）观察c需要用到的染色剂是 。

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    （3）与图示过程有关的具膜细胞器是 (填字母)。

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    （5）图中c处产生ATP的必要的外界条件是要有 。

    （6）物质3HX通过细胞膜的过程体现了细胞膜的 。

    （7）若3HX可使血糖浓度降低，则分泌该物质的细胞是 。

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