糖尿病是一种常见病，目前对胰岛素依赖型糖尿病的治疗多用激素疗法。胰岛素过去主要从动物中提取，基因工程技术发展以后，利用细菌生产胰岛素。其操作的基本过程如下图所示：

（1）该工程中，基因的剪刀是_________________；基因的针线是__________________；质粒作为载体，其基本组成单位是_______________________。

（2）剪取目的基因和剪切质粒时，应用同一种限制酶切割，这是为了___________________________________。

（3）检测目的基因是否进入了受体细胞，通常根据______________________来确定。

（4）人的基因能够在细菌体内表达，其物质基础是都以________________为遗传物质，都遵循__________________原则，而且共用一套________，从生物进化的角度看，说明了___________________________________。

（7分）应用生物工程技术能获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

（1）在培育转人生长激素基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是                     ，
如果在此过程中形成的是平末端，则起“缝合”作用的DNA连接酶来自                。
（2）上图中基因表达载体的组成，除了插入的人生长激素基因（或抗虫基因）外，还必须有复制原点、             、终止子、以及             基因。 
（3）培养转基因动物，②过程最常用的导入方法是                    。
（4）在构建重组Ti质粒的过程中，一般需用同种限制酶切割           个磷酸二酯键。
（5）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti质粒的T－DNA中是利用T－DNA                                            的特点。

20世纪以来，生物工程迅猛发展，人们应用生物工程技术已获得了多种需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

（1）图25中（I）是       ，在构建重组质粒的过程中，保证（I）与质粒具有相同黏性末端的是酶A、酶B中的     。
（2）在将（I）导入受体细胞之前需构建基因表达载体（重组质粒），其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够     。如果（II）受体细胞是大肠杆菌细胞，最常用的转化方法是：首先使用Ca²⁺处理菌体，使其处于一种能吸收周围环境中     的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。
（3）（II）~（III）的过程中要对受体细胞进行检测，目的是判断目的基因是否可以稳定维持和表达其遗传性状。若要检测目的基因是否转录出mRNA，可用    技术；若要检测目的基因是否表达出蛋白质，可用     技术。
（4）如果（I）是无限增殖调控基因prG（能激发细胞不断分裂），可通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，此时（II）最可能是      细胞，（III）代表的细胞具有      特点。
（5）如果（I）是抗虫基因，在抗虫棉的培育过程中，采用愈伤组织细胞作为受体细胞与采用叶肉细胞相比较，其优点是          ，转基因棉花受体细胞形成抗虫棉的过程中采用的技术是               。

20世纪以来，生物工程迅猛发展，人们应用生物工程技术已获得了多种需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

   （1）图25中（I）是        ，在构建重组质粒的过程中，保证（I）与质粒具有相同黏性末端的是酶A、酶B中的      。

   （2）在将（I）导入受体细胞之前需构建基因表达载体（重组质粒），其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够      。如果（II）受体细胞是大肠杆菌细胞，最常用的转化方法是：首先使用Ca²⁺处理菌体，使其处于一种能吸收周围环境中      的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。

（3）（II）~（III）的过程中要对受体细胞进行检测，目的是判断目的基因是否可以稳定维持和表达其遗传性状。若要检测目的基因是否转录出mRNA，可用     技术；若要检测目的基因是否表达出蛋白质，可用      技术。

（4）如果（I）是无限增殖调控基因prG（能激发细胞不断分裂），可通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，此时（II）最可能是       细胞，（III）代表的细胞具有       特点。

（5）如果（I）是抗虫基因，在抗虫棉的培育过程中，采用愈伤组织细胞作为受体细胞与采用叶肉细胞相比较，其优点是           ，转基因棉花受体细胞形成抗虫棉的过程中采用的技术是                。

20世纪以来，生物工程迅猛发展，人们应用生物工程技术已获得了多种需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

   （1）图25中（I）是        ，在构建重组质粒的过程中，保证（I）与质粒具有相同黏性末端的是酶A、酶B中的      。

   （2）在将（I）导入受体细胞之前需构建基因表达载体（重组质粒），其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够      。如果（II）受体细胞是大肠杆菌细胞，最常用的转化方法是：首先使用Ca²⁺处理菌体，使其处于一种能吸收周围环境中      的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。

（3）（II）~（III）的过程中要对受体细胞进行检测，目的是判断目的基因是否可以稳定维持和表达其遗传性状。若要检测目的基因是否转录出mRNA，可用     技术；若要检测目的基因是否表达出蛋白质，可用      技术。

（4）如果（I）是无限增殖调控基因prG（能激发细胞不断分裂），可通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，此时（II）最可能是       细胞，（III）代表的细胞具有       特点。

（5）如果（I）是抗虫基因，在抗虫棉的培育过程中，采用愈伤组织细胞作为受体细胞与采用叶肉细胞相比较，其优点是           ，转基因棉花受体细胞形成抗虫棉的过程中采用的技术是                。

（共22分）应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。
请据下图回答下列问题：

（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，①过程使用的DNA连接酶按其来源不同有两类，即        DNA连接酶和        DNA连接酶。②过程常用的方法是_______。
（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有____     。③过程培养到          阶段，可以采用_______     技术，培育出多头相同的转基因犊牛。
（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是        细胞，Ⅲ代表的细胞具有_______        的特点。
（4）在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是_______      ，⑤过程采用的技术______          。
（5）基因工程中除质粒外，                 也可作运载体。

（共22分）应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。

请据下图回答下列问题：

（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，①过程使用的DNA连接酶按其来源不同有两类，即         DNA连接酶和         DNA连接酶。②过程常用的方法是_______ 。

（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有____      。③过程培养到           阶段，可以采用_______      技术，培育出多头相同的转基因犊牛。

（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是         细胞，Ⅲ代表的细胞具有_______         的特点。

（4）在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是_______       ，⑤过程采用的技术______           。

（5）基因工程中除质粒外，                  也可作运载体。

绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和鲴织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA—，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶是__________。③过程需要的酶是__________。

（2）④过程将基因表达载体导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是__________。

（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用__________技术进行检测。

（4）用显微镜可观察到用于⑥过程的猪卵母细胞的卵黄膜和透明带之间有__________个极体。用于⑤过程的猪胎儿成纤维细胞，一般选用传代10代以内的细胞，原因是__________。

（5）由⑦过程获得的重组细胞培育成绿色荧光转基因克隆猪，涉及到的现代生物技术手段有__________。

（6）为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。若对⑧过程得到的囊胚阶段胚胎进行分割，要注意__________。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用__________处理，使之超数排卵，提高其繁育能力。