无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键，以下说法正确的是

①由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对无菌操作的要求非常严格　②对培养基及器械用高压蒸汽灭菌　③对培养材料进行表面灭菌时，一方面要考虑药剂的消毒效果，另一方面还要考虑植物材料的耐受能力　④培养中不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待　⑤对培养材料可用高压蒸汽灭菌　⑥如果不小心引起污染，将可能造成培养工作前功尽弃

A．①②③④⑤　　　　　                      B．①②③④

C．①②③④⑥                                         D．①②③④⑤⑥

(18分).植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示：

（1）科学家所用的这种生物技术叫做______________________。该技术表明，当植物细胞处于离体状态时，在一定的营养物质、___________（至少回答2种）等植物激素和其他外界条件的作用下，可能表现出___________，发育成完整植株。
(2)图中“酶解”所用的酶应该包括___________和___________。
(3)原生质体的结构包括________________三部分构成。
（4）图中c过程称为___________。通过c过程产生的愈伤组织细胞与根韧皮部细胞形态结构___________（相同/不同），其根本原因是______________________。
(5)一般在培养基上培养24～48小时后，大部分原生质体已再分
生出细胞壁。可以取样，利用25％的蔗糖溶液以及其他用具，通过______________________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。
（6）某课外小组同学用愈伤组织同时进行了两组实验：甲组培养基中含3%的蔗糖，乙组培养基中不含蔗糖，经灭菌后接种，每组实验再分成两个小组，分别在光下和暗处培养。1个月后，观察植物体生长、分化情况，结果如下表：

(18分).植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示：

（1）科学家所用的这种生物技术叫做______________________。该技术表明，当植物细胞处于离体状态时，在一定的营养物质、___________（至少回答2种）等植物激素和其他外界条件的作用下，可能表现出___________，发育成完整植株。

(2)图中“酶解”所用的酶应该包括___________和___________。

(3)原生质体的结构包括________________三部分构成。

（4）图中c过程称为___________。通过c过程产生的愈伤组织细胞与根韧皮部细胞形态结构___________（相同/不同），其根本原因是______________________。

 (5)一般在培养基上培养24～48小时后，大部分原生质体已再分

生出细胞壁。可以取样，利用25％的蔗糖溶液以及其他用具，通过______________________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。

（6）某课外小组同学用愈伤组织同时进行了两组实验：甲组培养基中含3%的蔗糖，乙组培养基中不含蔗糖，经灭菌后接种，每组实验再分成两个小组，分别在光下和暗处培养。1个月后，观察植物体生长、分化情况，结果如下表：

由此得出的结论是：①______________________；②______________________。

(7)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，需要经过（   ）

①无丝分裂  ②有丝分裂   ③减数分裂  ④原代培养    ⑤传代培养  ⑥植物体细胞杂交    ⑦细胞融合  ⑧脱分化  ⑨再分化

A．①④⑤⑦⑧ B. ②④⑤⑥⑧⑨       C．②⑧⑨       D．③⑥⑧⑨

(8)从图解可知，可在避光条件下进行的是___________ (用字母a～e回答)阶段，若为了获得三七的细胞产物，则只需培养到___________。若为了获得三七的人工种子，则需要培养到___________。

（13分）番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体，把目的基因重组入Ti质粒上的T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如图，请回答：

（1）在该操作流程图中用到的生物技术有_________________、_________________
（2）过程①需要的工具酶有__________________________。
（3）在构建基因表达载体时，重组质粒组成中除插入目的基因外（本题中的目的基因是____________），还包括____________、终止子以及______________。
（4）在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做______________
（5）从图中可见，mRNAl和mRNA2的结合直接导致了____________无法合成，最终使番茄获得
了         的特性。若上图中番茄是二倍体植株，经分析，该植株含有一个携带此目的基因的T—DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因番茄植株自交F₁代中，仍具有新特性的植株占总数的     。 多聚半乳糖醛酸酶基因与抗多聚半乳糖醛酸酶基因是否为等位基因？       。
（6）普通番茄细胞导入目的基因后，经【④】______过程形成的组织细胞的特点是_______，然后诱导出试管苗，进一步培养成正常植株。

番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体，把目的基因重组入Ti质粒上的T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如图，请回答：

（1）在该操作流程图中用到的生物技术有_________________、_________________

（2）过程①需要的工具酶有__________________________。

（3）在构建基因表达载体时，重组质粒组成中除插入目的基因外（本题中的目的基因是____________），还包括____________、终止子以及______________。

（4）在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做______________

（5）从图中可见，mRNAl和mRNA2的结合直接导致了____________无法合成，最终使番茄获得

了          的特性。若上图中番茄是二倍体植株，经分析，该植株含有一个携带此目的基因的T—DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因番茄植株自交F₁代中，仍具有新特性的植株占总数的      。 多聚半乳糖醛酸酶基因与抗多聚半乳糖醛酸酶基因是否为等位基因？        。

（6）普通番茄细胞导入目的基因后，经【④】______过程形成的组织细胞的特点是_______，然后诱导出试管苗，进一步培养成正常植株。

（16分）Ⅰ、马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答。

(1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，培养基中添加生长素和细胞分裂素，诱导离体细胞经过_______________和_____________完成组织培养过程，从而形成脱毒苗。此过程说明植物细胞具有________________。

(2)为获得抗病毒的马铃薯植株，往往采用转基因技术，将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内。其过程大致如下图所示。

①上述过程中，将目的基因导入马铃薯细胞使用了______________法。导入农杆菌时，首先要构建基因表达载体，这里需要的工具酶有_______________和_____________，还要用________处理土壤农杆菌，使之转变为感受态，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。目的基因导入马铃薯细胞后，是否可以稳定维持和表达，要通过检测与鉴定，马铃薯的DNA上是否插入了目的基因的检测方法是_______________________________,目的基因是否转录出了mRNA的检测方法是_______________________，目的基因是否翻译成蛋白质的检测方法是__________________________；通过做抗病毒接种实验，可以检测马铃薯是否具有抗病毒的特性，属于________水平的检测。

②该转基因马铃薯产生的配子中____________(填“一定”或“不一定”)含有目的基因。

Ⅱ、1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请根据图回答问题：

(1)病原体注入小鼠体内后，要经过__________细胞处理后形成抗原—MHG复合体，才能被免疫细胞识别。

(2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后以__________________作诱导剂，使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养，获得的杂交瘤细胞具有的特点是：

___________________________________________________________。

(3)单克隆抗体的特点是_____________________________________________________。