请回答下列生物技术有关问题：

(1)DNA变性后，当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链，称为________。PCR技术利用了DNA的________原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。

(2)在制备固定化酵母细胞过程中，溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，目的是防止__________________________________________________

________________________________________________________________________。

如果在CaCl2溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明固定的酵母细胞数目____________。

(3)若用花药进行离体培养则应选择花粉发育至__________期的花药培养成功率最高。

请回答下列生物技术有关问题：

(1)DNA变性后，当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链，称为，PCR技术利用了DNA的       原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。

(2)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、     和      等条件，使用过的培养基及其培养物必须经过        处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

(3)在制备固定化酵母细胞过程中，溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，目的是防止          。如果在CaCI2溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明固定的酵母细胞数目      。 

(4)若用花药进行离体培养则应选择花粉发育至    期的花药培养成功率最高。

（共14分）如图为通过花药培养月季花粉植株的一种途径。请回答下列相关问题。

如图为月季花药离体培养产生花粉植株的一种途径。请回答下列相关问题。

（1）一般来说，在      期，细胞核由中央移向细胞一侧，花药培养成功率最高。确定花粉发育时期一般用       法染色，然后通过        确定花粉是否处于适宜的发育期。
（2）通过花药培养产生花粉植株，一般有两种途径，即通过胚状体阶段发育为植株和通过愈伤组织发育为植株，通过哪条途径实现，主要取决于培养基中             。
（3）灭菌后的花蕾，在剥离花药时，要彻底去除花丝，这是因为与花丝相连的花药不利于
                  的形成。
（4）若欲获取大量抗性基因导入愈伤组织细胞，可以采用PCR技术。PCR技术利用了    
           原理，通过控制温度来控制DNA双链的解聚与结合。为了避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管等用具在使用前必须进行            。
（5）微生物的实验室培养与以上植物组织培养过程不同，但也需要非常严格的操作。使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)操作称为              ，常用的消毒方法有                                          等方法(答出三种)。

如图为月季花药离体培养产生花粉植株的一种途径。请回答下列相关问题。

（1）一般来说，在       期，细胞核由中央移向细胞一侧，花药培养成功率最高。确定花粉发育时期一般用        法染色，然后通过         确定花粉是否处于适宜的发育期。

（2）通过花药培养产生花粉植株，一般有两种途径，即通过胚状体阶段发育为植株和通过愈伤组织发育为植株，通过哪条途径实现，主要取决于培养基中              。

（3）灭菌后的花蕾，在剥离花药时，要彻底去除花丝，这是因为与花丝相连的花药不利于

                   的形成。

（4）若欲获取大量抗性基因导入愈伤组织细胞，可以采用PCR技术。PCR技术利用了    

            原理，通过控制温度来控制DNA双链的解聚与结合。为了避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管等用具在使用前必须进行             。

（5）微生物的实验室培养与以上植物组织培养过程不同，但也需要非常严格的操作。使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)操作称为               ，常用的消毒方法有                                           等方法(答出三种)。