Question

【题目】图甲、乙分别表示质粒和外源DNA，其中箭头表示相关限制酶的酶切位点，下列叙述正确的是（　　）

A. 用质粒和外源DNA构建重组质粒过程中，不能使用SmaI切割

B. 图甲所示的质粒分子在经SmaI酶切割后含有4个游离的磷酸基团

C. 为获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入DNA聚合酶

D. 用EcoRI、HindⅢ和BamHI中的任意一种酶切割质粒和外源基因都可以

Answer 1

【答案】A

【解析】据图分析，质粒中，SmaI的切割位点位于标记基因（抗生素抗性基因）上，在外源DNA分子中，SmaⅠ的切割位点位于目的基因上，因此用质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，A正确；图甲所示的质粒分子只有一个SmaⅠ切割位点，所以在经SmaⅠ酶切割后含有2个游离的磷酸基团，B错误；为获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶，C错误；只使用EcoRⅠ，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用连接酶连接时，会产生质粒和目的基因自身连接物，而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切时，在目的基因上只有一个酶切位点，因此不能切割目的基因，D错误。