Question

16．北极比目鱼中有抗冻基因，如图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，请回答．

（1）过程①所用的酶是逆转录酶．PCR也是获取目的基因的常用方法，taq酶催化互补链的合成最适温度为70～75℃．
（2）基因工程的核心步骤基因表达载体的构建，该过程在DNA连接酶催化作用下，把经过同种限制性内切酶切割的目的基因和质粒进行连接．
（3）重组质粒中的标记基因的作用是便于目的基因的检测和鉴定，在动物基因工程中，受体细胞一般选择受精卵．
（4）从个体水平看，基因工程成功的标志是蕃茄具有了抗冻性状．检测转基因生物染色体DNA上是否插入了目的基因的方法是DNA分子杂交技术，该过程用被标记的含有目的基因的DNA片段为探针．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：①表示反转录法获取目的基因的过程；②表示基因表达载体的构建过程；之后采用农杆菌转化法，将目的基因导入番茄组织块；最后采用植物组织培养技术，将导入目的基因的番茄组织细胞培养成抗冻番茄植株．基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，利用农杆菌转化法能将质粒导入受体细胞．

解答 解：（1）分析图解可知，过程①表示反转录法获取目的基因的过程，因此该过程所用的酶是逆转录酶．PCR也是获取目的基因的常用方法，taq酶催化互补链的合成最适温度为70～75℃．
（2）基因工程的核心步骤基因表达载体的构建，该过程在DNA连接酶催化作用下，把经过同种限制性内切酶切割的目的基因和质粒进行连接．
（3）重组质粒中的标记基因的作用是便于目的基因的检测和鉴定，在动物基因工程中，由于受精卵具有全能性，因此受体细胞一般选择受精卵．
（4）从个体水平看，基因工程成功的标志是蕃茄具有了抗冻性状．检测转基因生物染色体DNA上是否插入了目的基因的方法是DNA分子杂交技术，该过程用被标记的含有目的基因的DNA片段为探针．
故答案为：
（1）逆转录酶    70～75℃
（2）基因表达载体的构建     DNA连接酶 
（3）便于目的基因的检测和鉴定    受精卵
（4）蕃茄具有了抗冻性状  DNA分子杂交技术  被标记的含有目的基因的DNA片段

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及意义，掌握基因工程采用的工具及具体操作步骤，能准确判断图中各步骤的名称，再结合所学的知识准确分析各小题．