Question

花椰菜易感染黑腐病菌而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力．再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株．流程如下图．

据图回答下列问题：
（1）过程①所需的酶是

 

，体现了酶的

 

性．
（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的

 

存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志．
（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是

 

．原生质体经过

 

再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织．
（4）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗

 

，而与

 

配比适宜时可促进芽的增殖．若要抑制试管苗的生长，促进愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是

 

．（脱落酸、2，4-D）
（5）要想检测导入的黑腐病抗性基因基因是否表达，在分子水平上可用

 

法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品．

Answer 1

考点：植物体细胞杂交的过程,植物培养的条件及过程

专题：

分析：（1）酶解法去掉细胞壁，获得原生质体，与必修一酶的专一性相结合．
（2）等渗溶液维持细胞的渗透压能保持细胞原有的形态．

解答： 解：（1）①过程为原生质体的制备，需要去掉细胞壁，细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，酶具有专一性等特点，故用纤维素酶和果胶酶；
（2）②为诱导融合，受体细胞是易感的幼根，供体是抗病的幼叶，诱导成功则在显微镜下能观察到融合的活细胞中有供体的幼叶的叶绿体存在；
（3）去掉细胞壁后的原生质体，类似于动物细胞，易吸水涨破失水皱缩，适宜浓度的甘露醇可以维持一定的渗透压，能保持原生质体完整性，杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁，才能诱导脱分化再分化；
（4）生长素可以诱导生根，和细胞分裂素混合使用可以诱导生芽，要注意其中两种激素的浓度、比例及使用的先后顺序，2，4-D是植物生长调节的促进剂，脱落酸是植物生长调节的抑制剂；
（5）基因表达的产物是蛋白质，故检测导入的黑腐病抗性基因基因是否表达，应用抗原-抗体杂交法检测；
故答案为：
（1）纤维素酶和果胶酶         专一
（2）叶绿体
（3）保持原生质体完整性       细胞壁
（4）生根    细胞分裂素      2，4-D
（5）抗原-抗体杂交

点评：本题考查学生的综合运用能力，将植物体细胞杂交技术与基因工程相结合，并考查了必修三中植物激素的功能，既有复习回顾，又突出了本节重点，比较综合．