Question

【题目】干扰素基因缺失的个体免疫力严重下降。科学家利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗。请回答下列问题：

（1） 胚胎干细胞可由囊胚的_______细胞分离培养获得，在饲养层细胞上能够维持_______的状态。

（2） 利用PCR技术扩增干扰素基因时，需在______________________酶的作用下进行。PCR技术主要利用了______________的原理。

（3） 将经过修饰的腺病毒与干扰素基因重组形成的_______________转移到ES细胞中，筛选出成功转移的细胞进行扩增培养。对改造后的ES细胞进行培养的过程中，为了防止污染，可在培养基中添加一定量的___________________。

（4） 有人得到如图所示的含有目的基因的表达载体，但其不能在宿主细胞中表达目的基因产物，分析目的基因不能表达的原因是__________________。

（5）由于干扰素很难在体外保存，为解决这一问题，可利用蛋白质工程对干扰素进行改造， 基本途径是：预期蛋白质功能→设计预期蛋白质的结构→推测应有的____________→找到对应的脱氧核苷酸序列。

Answer 1

【答案】内细胞团不分化耐高温DNA聚合（或Taq或热稳定DNA聚合）DNA双链复制基因表达载体抗生素目的基因插入在终止子的下游，目的基因不能被转录氨基酸序列

【解析】

试题分析：分析（4）题图，图示为重组质粒，含有启动子、终止子、目的基因、复制原点和抗生素抗性基因，由于目的基因插入的部位不在启动子与终止子之间，所以无法表达。

（1）ES细胞是由早期胚胎（囊胚的内细胞抱团）或原始性腺中分离出来的一类细胞，利用其具有（发育的）全能性，可以将其培养成人体各种组织器官；在饲养层细胞上能够维持不分化的状态。

（2）PCR技术利用的原理是DNA双链复制，需要耐高温的DNA聚合酶的催化。

（3）经过修饰的腺病毒相当于运载体，与干扰素（目的基因）重组，形成基因表达载体。抗生素具有杀菌作用，可以防止杂菌污染。

（4）根据以上分析已知，由于目的基因插入在终止子的下游，目的基因不能被转录。

（5）蛋白质工程属于第二代基因工程，其基本途径是：预期蛋白质功能→设计预期蛋白质的结构→推测应有的氨基酸序列_→找到对应的脱氧核苷酸序列。