Question

【题目】下图是克隆羊的培育流程图，根据所学知识回答下列问题。

（1）培育克隆羊时用到的卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养到___________期。

（2）从供体羊中取上皮细胞，用 处理，然后进行分散培养。整个过程必须保证细胞处于

的环境中，所需营养物质要与体内基本相同。进行细胞培养时，通常采用培养皿或者松盖培养瓶，将其置于含 的混合气体的培养箱中进行培养。

（3）通过 法吸出卵母细胞中的细胞核，微型吸管除了将细胞核吸除外，往往还会将

一并吸出。

（4）去核的卵母细胞与供体细胞通过 后融合，供体核进入受体卵母细胞，构建成重组胚胎，

融合后的重组胚胎，需要用物理或化学的方法进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程。

（5）用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，因为 。

（6）将重组胚胎发育到一定阶段，移植到同种的且 相同的其他雌性动物体内，使之继续发育，最后形成克隆羊。移入的胚胎能够存活，是因为代孕子宫并不会对其发生 ，同时能够与受体子宫建立正常的 联系。

（7）欲培养高产奶山羊这一优良品种，对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的 细胞进行鉴定，一般采用SRY-PCR方法，选择出现 （填“阳”或者“阴”）性反应的雌性胚胎进行移植。

Answer 1

【答案】（1）减数第二次分裂中期

（2）胰蛋白酶 无菌、无毒 95%空气加5%CO2

（3）显微操作 第一极体

（4）电击

（5）10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此，在体细胞核移植中，为保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用传代10代以内的细胞

（6）生理状态 免疫排斥反应 生理和组织联系

（7）滋养层细胞 阴性

【解析】（1）培育克隆羊时用到的卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养到减数第二次分裂中期

（2）从供体羊中取上皮细胞，用胰蛋白酶处理，然后进行分散培养。整个过程必须保证细胞处于无菌、无毒的环境中，进行细胞培养时，通常采用培养皿或者松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，其中95%空气是细胞代谢必需的，5%的CO2维持培养液的PH值

（3）通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核，微型吸管除了将细胞核吸除外，往往还会将第一极体一并吸出。

（4）去核的卵母细胞与供体细胞通过电击后融合，供体核进入受体卵母细胞，构建成重组胚胎，

（5）用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此，在体细胞核移植中，为保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用传代10代以内的细胞

（6）将重组胚胎发育到一定阶段，移植到同种的且生理状态相同的其他雌性动物体内，使之继续发育，最后形成克隆羊。移入的胚胎能够存活，是因为代孕子宫并不会对其发生免疫排斥反应，同时能够与受体子宫建立正常的生理和组织联系。

（7）欲培养高产奶山羊这一优良品种，对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的滋养层细胞进行鉴定，一般采用SRY-PCR方法，选择出现阴性反应的雌性胚胎进行移植。