Question

6．灭活的肿瘤细胞可作为疫苗用以提高机体对该类型肿瘤的免疫力．研究者利用热休克蛋白（HSP70）基因转入白血病细胞株（HL-60）制备疫苗并研究该疫苗的作用，过程及结果如下．

（1）构建HSP70基因表达载体时需使用的工具酶有限制酶和DNA连接酶．在目的基因前需添加信号肽所对应的编码序列，信号肽可引导刚翻译出的HSP70进入内质网（细胞器），并最终使HSP70定位于HL-60细胞的表面．用抗HSP70的抗体（抗原-抗体杂交技术）检测后发现，只有③组的HL-60细胞表面具有HSP70．设置②组作为对照，目的是排除空载体对实验结果的影响．
（2）据A项检测结果可知，膜表面具有HSP70的HL-60细胞能促进T淋巴细胞增殖．
（3）乳酸脱氢酶存在于每个细胞中，正常情况下很难透过细胞膜．在B项检测中，48h后加入的HL-60细胞成为细胞裂解的对象，因而培养液中的乳酸脱氢酶含量可直接反映效应T效应T细胞裂解靶细胞的能力．
（4）综上所述，HSP70能增强白血病肿瘤疫苗引起机体产生（特异性）免疫的能力，为白血病细胞治疗和预防复发的带来希望．

Answer 1

分析 分析图1：①②两组作为对照组，③作为实验组，A项检测T淋巴细胞的增殖能力，B项检测培养液中乳酸脱氢酶的含量．
分析图2：①②中A项检测和B项检测的结果相同，而③中A项检测和B项检测结果均明显高于①②，A项检测结果说明膜表面具有HSP70的HL-60细胞能促进T淋巴细胞增殖，B项检测结果可直接反映效应T效应T细胞裂解靶细胞的能力．

解答 解：（1）构建基因表达载体时，首先需要限制酶切割外源DNA分子和运载体，其次需要DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．在目的基因前需添加信号肽所对应的编码序列，信号肽可引导刚翻译出的HSP70进入内质网，并最终使HSP70定位于HL-60细胞的表面．检测目的基因是否翻译形成相应的蛋白质，可采用抗原-抗体杂交技术．设置②组作为对照，目的是排除空载体对实验结果的影响．
（2）据A项检测结果可知，转入HSP70基因表达载体的HL-60，T淋巴细胞增殖能力明显增强，这说明膜表面具有HSP70的HL-60细胞能促进T淋巴细胞增殖．
（3）乳酸脱氢酶存在于每个细胞中，正常情况下很难透过细胞膜，但若细胞被裂解，乳酸脱氢酶即可从细胞出来，导致培养液中乳酸脱氢酶的含量升高．因此在B项检测中，48h后加入的HL-60细胞成为细胞裂解的对象，培养液中的乳酸脱氢酶含量可直接反映效应T效应T细胞裂解靶细胞的能力．
（4）综上所述，HSP70能增强白血病肿瘤疫苗引起机体产生（特异性）免疫的能力，为白血病细胞治疗和预防复发的带来希望．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶    内质网     抗HSP70的抗体（抗原-抗体杂交技术）     排除空载体对实验结果的影响
（2）促进T淋巴细胞增殖
（3）效应T效应T细胞裂解靶细胞
（4）细胞治疗和预防复发

点评 本题结合图解，考查基因工程及相关的探究实验，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；掌握探究实验的原则，能根据图中信息准确答题，属于考纲理解层次的考查．