Question

10．科学家设法将生长激素基因导入其它生物体（细胞）内，从而获取大量的生长激素，应用于侏儒症的早期治疗，如图所示．请据图回答：
（1）过程①采用的方法是反转录，进行过程②之前需用特定的限制酶处理目的基因和质粒．
（2）过程③需首先对大肠杆菌用Ca²⁺处理，使其处于感受态，然后进行转化．转化的具体操作方法是将重组质粒溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子．
（3）过程④动物细胞培养中使用的工具酶是胰蛋白酶，与植物组织培养的培养基相比，动物细胞培养液中通常需加入动物血清．
（4）过程⑤一般是将生长激素基因导入奶牛的受精卵．为保证目的基因只在乳腺中表达，在构建重组质粒时，需将人的生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起．

Answer 1

分析 1、根据题意和图示分析可知：图中过程①从人体组织细胞中获取人生长激素mRNA，并进行逆转录合成目的基因，②表示利用DNA连接酶构建基因表达载体，③④⑤表示目的基因导入受体细胞．
2、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．

解答 解：（1）过程①是利用mRNA合成DNA，采用的方法是反转录，进行过程②之前需用特定的限制酶处理目的基因和质粒，产生相同的末端．
（2）过程③需首先对大肠杆菌用Ca²⁺处理，使其处于感受态，然后进行转化．转化的具体操作方法是将重组质粒溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子．
（3）过程④动物细胞培养中使用的工具酶是胰蛋白酶，使动物细胞相互分散开来，与植物组织培养的培养基相比，动物细胞培养液中通常需加入动物血清．
（4）过程⑤一般是将生长激素基因导入奶牛的受精卵．为保证目的基因只在乳腺中表达，在构建重组质粒时，需将人的生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起．
故答案为：
（1）反转录　限制酶   
（2）Ca²⁺　将重组质粒溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子　
（3）胰蛋白酶（胶原蛋白酶）   动物血清
（4）受精卵　 乳腺蛋白基因的启动子

点评 本题考查了基因工程的相关知识，要求考生能够识记基因工程的操作步骤；识记细胞分化过程中基因选择性表达，明确生长激素基因只在垂体细胞中表达；识记并区分目的基因导入不同细胞的方法；明确目的基因和质粒需要同种限制酶切割．