[题目]回答下列小题(一)人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃.可用来发酵处理秸秆.提高秸秆的营养价值.为了增强发酵效果.研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株.并对其降解纤维素能力进行了研究.请回答:(1)在样品稀释和涂布平板步骤中.下列选项不需要的是 ①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水(2)在涂布平板时.滴加到培养基表面的菌悬液� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】回答下列（一）、（二）小题

（一）人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究，请回答：

（1）在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是_________（填序号）

①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水

（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是______________________。

（3）向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是________________________________________。

（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见图）。图中降解圈大小与纤维素酶的_____________有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是_________（填图中序号）

（5）分离得到的纤维素酶高产菌株若进行扩大培养需在________条件下，用___________(工具)完成接种。

（二）甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质。为了改善黄瓜的品质，科学家采用农杆菌转化法将一种甜蛋白基因成功导入黄瓜细胞，得到了转基因植株。回答下列问题：

（1）用农杆菌感染时，应优先选用黄瓜_____________（填“受伤的” 或“完好的”）叶片与含重组质粒的农杆菌共培养，选用这种叶片的理由是__________________________________。

（2）若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白，则表明该重组质粒中_______________已转移到植物细胞中且能够表达；用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为1∶1，则说明甜蛋白基因已经整合到_____________（填“核基因组” “线粒体基因组” 或“叶绿体基因组”）中。

（3）假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产，若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗，应选用______________________作为外植体进行组织培养。

（4）通常，基因工程操作主要有4 个步骤，即目的基因获取、重组表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。因此，基因工程的含义可概括为_____________、______________________________________。

【答案】③ 培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果避免培养基污染棉塞量与活性 ① 无菌接种环受伤的伤口处细胞释放大量物质（酚类）可吸引农杆菌移向这些细胞甜蛋白基因核基因组茎尖根据人们愿望，让人们感兴趣的基因通过体外重组和转基因等技术赋予生物新的遗产特性，创造出符合人们需要的生物类型

【解析】

1、微生物培养的关键是无菌操作，无菌技术包括消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

2、微生物培养过程中除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件，需对培养基和培养皿进行消毒。

3、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

4、可以通过稀释涂布平板法或显微镜计数法进行统计计数。

5、刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

6、基因工程的概念：

基因工程的别名	基因拼接技术或DNA重组技术
操作环境	生物体外
操作对象	基因
操作水平	DNA分子水平
基本过程	剪切→拼接→导入→表达
结果	人类需要的基因产物
原理	基因重组

（一）

（1）在样品稀释和涂布平板步骤中，需要使用酒精灯对接种环进行灭菌，对培养皿进行灭菌，用无菌水稀释菌液，故选③。

（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量过多会在培养基表面出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果，所以不能过多。

（3）分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净以防杂菌污染。

（4）在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落，降解圈大小与纤维素酶的多少和活性有关．纤维素酶的量越多，活性越强，分解的纤维素越多，透明降解圈越大，所以图中降解纤维素能力最强的菌株是①。

（5）分离得到的纤维素酶高产菌株若进行扩大培养需在无菌条件下，用接种环完成接种。

（二）

（1）由于叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞，因此用农杆菌感染时，应优先选用黄瓜受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共培养。

（2）若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白，则表明该重组质粒中甜蛋白基因已转移到植物细胞中且能够表达；用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为1：1，则说明甜蛋白基因已经整合到核基因组中。

（3）由于茎尖等分生组织中几乎不含病毒，因此要以该转基因作物为材料获得脱毒苗，应选用茎尖作为外植体进行组织培养。

（4）根据基因工程的操作步骤可推知，基因工程的概念是将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。

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