Question

【题目】我国粮产区产生大量的作物秸秆，科技工作者为使其变废为宝研究出利用秸秆生产燃料酒精的技术，为汽车用乙醇汽油提供来源，其大致流程如下（以玉米秸秆为例）：

（1）玉米秸秆预处理后，应该选用特定的酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。从以下哪些微生物中可以提取到上述的酶？ （______）

A.酿制果醋的醋酸菌

B.生长在腐木上的霉菌

C.制作酸奶的乳酸菌

D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌

（2）若要从土壤中分离生产这种酶的微生物，所需要的培养基为________（按功能分），培养基中的碳源为___________。对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_________ 。

（3）某同学对这种微生物培养液进行数量测定，在稀释倍数为105对应的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL） _______________。

（4）用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的菌落数量多，原因是__________ 。

（5）上述流程图中，发酵阶段需要的菌种是_____，生产酒精要控制的必要条件是______。

Answer 1

【答案】 B 选择培养基 纤维素 高压蒸汽灭菌法 1.17×107 当两个或多个细胞连在一起时、繁殖成一个菌落，平板上观察的是一个个菌落 酵母菌 无氧（密封、密闭）

【解析】试题分析：本题主要考查纤维素分解菌的筛选和发酵产纤维素酶分解纤维素产生葡萄糖的实验，要求学生掌握实验的原理和方法，掌握微生物培养过程中的灭菌方法，掌握酿酒的原理和方法，用植物秸秆生产酒精是利用微生物进行发酵的过程。植物秸秆中的有机物主要是纤维素，纤维素分解菌产生的纤维素酶能将其水解成葡萄糖。从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。筛选纤维素分解菌必须使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，并且需要对纤维素酶分解纤维素后所产生的的葡萄糖进行定量测定。

（1）根据生物对环境适应性的原理，要获得能大量产生纤维素酶的菌种，应该从主要以纤维素为碳源的微生物中筛选，如：生长在腐木(主要成分为纤维素)、反刍动物瘤胃中生存的很多微生物等均可能产生大量的纤维素酶，故选：B。

（2）筛选目的微生物需要使用选择培养基，培养基中的碳源为纤维素，培养基需要进行高压蒸汽灭菌法灭菌。

（3）每克（ml）样品中的菌株数＝C/V×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表稀释平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。C=23.4个，V=0.2ml，M=105，把上述数据代入公式可得稀释前1mL菌液中所含细菌= C/V×M=23.4/0.2×105=1.17×107个。

（4）用稀释涂布平板法进行微生物计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落，所以实际活菌数量要比测得的菌落数量多。

（5）上述流程图中，发酵阶段需要的菌种是酵母菌，酵母菌无氧呼吸可以产生酒精，生产酒精要控制的必要条件是无氧（密封、密闭）。