Question

【题目】长期以来，香蕉生产遭受病害的严重威胁，制约了其发展。目前，随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟，为培育抗病香蕉品种开辟了新途径。转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等四种限制酶切割位点。请回答：

（1）能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是：___________，培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导人抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有___________，作为标记基因。

（2）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶___________，对含抗病基因的DNA和质粒进行切割。欲检测目的基因是否表达成功，可采用的技术______________________ 。目的基因能都在真核细胞中稳定遗传的关键是 。

（3）香蕉具有不耐储存的特点，科学家把控制香蕉成熟的基因导入香蕉，获得转基因延熟香蕉，储存时间可以延长两个周。在延熟过程中，R蛋白起着很关键的作用。我们如果用蛋白质工程来生产R蛋白，应从

出发来设计预期的蛋白质结构，再推测应有的氨基酸序列。

（4）科学家把得到的抗病香蕉和耐储存的香蕉做成了人工种子，人工种子就是以植物组织培养得到的

等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。在其他方面，科学家历尽艰辛万苦把番茄和马铃薯融合在一起但并没有得到预期的结果，尽管如此，这项研究还是在 取得巨大的突破。

Answer 1

【答案】

（1）启动子、终止子 抗卡那霉素基因（1分）

（2）PstⅠ、EcoRⅠ 抗原—抗体杂交技术 转基因生物染色体的DNA上是都插入了目的基因

（3）预期的蛋白质的功能出发

（4）胚状体、不定芽、顶芽和腋芽 克服不同生物远缘杂交的障碍上

【解析】

（1）目的基因在受体细胞中表达，需要在前面接上启动子，是RNA聚合酶的结合位点，起始转录，在后面街上终止子，终止翻译。需要用的抗生素抗性基因做标记基因。

（2）PstⅠ、EcoRⅠ位于目的基因的两端，且质粒上有这两个酶切位点。目的基因和质粒都需要切割，检测成功表达也就是检测蛋白质的生成，抗原抗体杂交即可。目的基因在真核细胞中稳定遗传的关键就是能整合到受体细胞的DNA上。

（3）蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质的结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列。

人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽、腋芽为材料，经过人工包膜包装得到的种子，可以在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

（4）植物体细胞杂交技术的优点就是克服远缘杂交不亲和的障碍，或者是打破了生殖隔离。