Question

【题目】某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如图甲所示:图乙是单克隆抗体制备流程的简明示意图。请回答下列有关问题: .

(1)制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过__________次免疫后 才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是__________小鼠，理由是______。

(2)图乙中的过程②诱导融合运用的原理是___________， 该过程中区别于植物原生质体融合的方法是用___________处理。

(3)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有_____,(只考虑细胞两两融合)。融合后需要用特定的__________培养基师选，只有杂交瘤细胞才能生长，该细胞的特点是___________。

(4)经过筛选和克隆化培养得到杂交瘤细胞后，一般采用体内培养和体外培养两种方式，动物细胞体外培养时通入适量CO2的目的是_____。

(5) 未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是__________。

Answer 1

【答案】四 Y Y的血清抗体效价最高 细胞膜的流动性 灭活的病毒 B淋巴细胞相互融合形成的细胞、鼠骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞 选择 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 维持培养液的pH （已免疫的）B淋巴细胞已高度分化（或不能无限增殖）

【解析】

试题本题结合图解，考查体液免疫及单克隆抗体的制备过程。分析柱形图：用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价，由图可知，随着免疫次数的增加，血清抗体效价逐渐升高。在第四次免疫过程中出现了Y血清抗体均达到16000以上；在第五次中，Y的效价最大，最适合用于制备B淋巴细胞；B细胞与骨髓瘤细胞形成的杂交细胞有三种：B淋巴细胞自身融合的细胞，骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交瘤细胞。

（1）由图可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价均达到16000以上，因此小鼠最少需要经过四次免疫后 才能有符合要求的。小鼠Y的B淋巴细胞产生血清抗体效价最高，最适用于制备B淋巴细胞。
（2）图乙中的过程②为小鼠B细胞和骨髓瘤细胞的融合，制备单克隆抗体用到了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术，运用的原理是细胞膜的流动性。该过程中区别于植物原生质体融合的方法是用灭活的病毒处理。
（3）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有B淋巴细胞相互融合形成的细胞、鼠骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞。融合后需要用特定的选择性培养基筛选，只有融合的杂种细胞才能生长，这种细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体。
（4）动物细胞体外培养需要满足的条件：无菌、无毒的环境、营养、温度和pH、气体环境。通入适量CO2的目的是维持培养液的pH。
(5)（已免疫的）B淋巴细胞已高度分化（或不能无限增殖），未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活。