Question

【题目】基因工程中，需要使用限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。

⑴根据已知条件和图回答下列问题：

①上述质粒用限制酶________切割，目的基因用限制酶__________切割。

②将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，还要加入适量的__________。

③请指出质粒上至少要有一个标记基因的理由：_____________________。

⑵不同生物的基因可以拼接的结构基础是____________________________________。

⑶利用PCR技术可获取目的基因，据图回答下列问题：

①PCR技术的原理是_____________，利用PCR技术获取目的基因的前提是_____________。

②由图中信息分析可知，催化C过程的酶是_______，它与正常细胞里的酶的区别是_________。

Answer 1

【答案】 Ⅰ Ⅱ DNA连接酶 检测重组质粒(或目的基因)是否导入受体细胞 DNA结构基本相同 DNA分子半保留复制 要有一段已知目的基因的核苷酸序列 DNA聚合酶 能耐高温

【解析】试题分析：本题考查基因工程相关知识，限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶II的识别序列和切点是-↓GATC-，可知限制酶II能够识别和切割限制酶I切割后的黏性末端。

⑴①据题图可知，目的基因两端分别是限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-和限制酶II的识别序列和切点是-↓GATC-，只有用限制酶II才能将目的基因切割下来。

②将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，要用DNA连接酶连接。

③标记基因的存在是为了方便筛选出成功导入的重组质粒。

⑵不同生物的基因可以拼接的结构基础是DNA结构基本相同。

⑶①PCR技术的原理是DNA分子半保留复制，利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列。

②C过程为DNA合成，该过程需要的酶是DNA聚合酶 ，它的作用环境是72摄氏度左右，故其与正常细胞里的酶的区别是能耐高温。