Question

【题目】图（a）中的三个DNA片段上以此表示出了EcoRI、BamHI和Sau3AI三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图（b）为某种表达载体示意图（载体上的EcoRI、Sau3AI的切点是唯一的）
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）经BamHI酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被酶切后的产物连接，理由是 ．
（2）若某人利用图（b）所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图（c）所示．这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有 ， 不能表达的原因是 ．
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和 ， 其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是 ．

Answer 1

【答案】
（1）Sau3AI；两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端
（2）甲、丙；甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游，二者的目的基因均不能被转录
（3）E?coliDNA连接酶；T4DNA连接酶；T4DNA连接酶
【解析】解：（1）分析图解可知，限制酶Sau3AI和BamHI酶切割后形成的黏性末端相同，因此经BamHI酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被Sau3AI酶切后的产物连接．（2）在基因表达载体中，启动子位于目的基因的首端，终止子应位于目的基因的尾端，这样的基因才能表达．图中甲和丙均不符合，所以不能在宿主细胞中表达目的基因产物．（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是T4DNA连接酶． 所以答案是：（1）Sau3AI；两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端；（2）甲、丙；甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游，二者的目的基因均不能被转录（3）EcoliDNA连接酶；T4DNA连接酶；T4DNA连接酶
【考点精析】根据题目的已知条件，利用基因工程的原理及技术的相关知识可以得到问题的答案，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术．