Question

【题目】研究人员用四倍体马铃薯（4n=48）和抗青枯病的野生型二倍体马铃薯（2n=24）进行体细胞杂交，培育抗青枯病的马铃薯。

（1）研究人员用四倍体马铃薯的叶片探究原生质体制备条件，结果如下表所示。

①据表分析，制备原生质体的最佳组合是第_____组，叶片解离程度主要取决于________的浓度。

②制备的原生质体应置于浓度__________________马铃薯叶片细胞液浓度的溶液中进行培养，以保持原生质体的正常形态。

（2）为了便于在显微镜下对杂种细胞进行镜检筛选，将用四倍体马铃薯叶片制备的原生质体与用

野生型马铃薯的__________（填“叶片”或“幼根”）为材料制备的原生质体进行融合。把两种原生质体置于加入__________的溶液中促融。

（3）为进一步从染色体水平上检测杂种植株，科学家选取杂种植株根尖进行__________后用碱性染料染色并制片，显微镜下对__________期的细胞进行染色体计数。

（4）为达到育种目标，还需要对杂种植株进行______抗性检测以筛选得到抗性马铃薯。

Answer 1

【答案】 5 果胶酶 略高于或等于 幼根 PEG或聚乙二醇 解离、漂洗 有丝分裂中期 青枯病

【解析】本题主要考查植物体细胞杂交。要求学生熟知植物体细胞杂交的过程，以及对杂交结果的检测。同时还考查了对表格的分析能力。

（1）①据表分析，制备原生质体的最佳组合是第5组，其原生质体的产量最高。根据第1组和第2组、第3组和第4组的纤维素酶浓度相同，果胶酶浓度不同，实验结果原生质的产量不同，可知：叶片解离程度主要取决于果胶酶的浓度。
②制备的原生质体应置于浓度略高于或等于马铃薯叶片细胞液浓度的溶液中进行培养，以保持原生质体的正常形态。浓度相差较大，原生质体会发生渗透失水或吸水。
（2）可根据染色体的形态和数目对杂种细胞进行镜检筛选，将用四倍体马铃薯叶片制备的原生质体与用野生型二倍体马铃薯的幼根为材料制备的原生质体进行融合．（幼根有分裂增殖能力，能观察到染色体）。把两种原生质体置于加入PEG（或“聚乙二醇”）的溶液中促融．
（3）为进一步从染色体水平上检测杂种植株，显微镜下观察细胞的有丝分裂，应对杂种植株根尖进行解离、漂洗后用碱性染料染色并制片，选择有丝分裂中期的细胞进行染色体计数，因为中期的染色体数目更清晰。
（4）为达到育种目标，还需要进行个体水平的鉴定，即对杂种植株进行青枯病抗性检测以筛选得到抗性马铃薯新种．